細胞簡介:
小鼠外周血來源內皮祖分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構,其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠外周血來源內皮祖采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠外周血來源內皮祖經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 外周血 | 產品貨號 | YS-01X7578 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 ,英文名: LIFR ELISA Kit
Mouse beta endorphin (beta -EP) ELISA Kit 小鼠β內啡肽(β-EP)試劑盒
ELISA 小鼠X(mouse FX) 進口分裝
CLIAKitforiso-Hyd(HumanIsoprenalineHydrochloride)ELISAKit人異
通用型丁酰酯酶活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitTNFsR-Ⅰ大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ
兔子白介素9(IL-9)試劑盒 96T/48T
兔子白介素4(IL-4)試劑盒 96T/48T
兔子白介素3(IL-3)試劑盒 96T/48T
兔子白介素2(IL-2)試劑盒 96T/48T
α-(1,3)-巖藻糖基轉移酶 4抗體
小鼠癌標志物-CA153ELISA 試劑盒 96T/48T
Human endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 人內皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒
Humanβai-galactanproteinsIgGELISAKit 人β乳糖蛋白抗體IgG試劑盒 96T/48T 進口分裝
guineapigEndothelin1,ET-1試劑盒豚鼠內皮素1(ET-1)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20次
Mousecholinephosphoglyceride,PC/CPGELISAKit小鼠0酸甘油酯(PC/CPG)試劑盒規格:96T/48T
顆粒酶D/B/E/N/G/F/H抗體
IL8重組食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白 Protein
Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin 0.5mgLivin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin) 一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)
IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 Protein
GOT1 Protein Human 重組人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白
TNFSF10 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標簽)
小鼠外周血來源內皮祖細胞Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin 0.5mgLivin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin) 一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)
GOT1 Protein Human 重組人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白
IL8重組食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白 Protein
TNFSF10 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標簽)
IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 Protein