細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠外周血淋巴分離自外周血;所謂的外周血,即除骨髓之外的血液,就是已經被造血器官釋放入循環系統參與循環的血,它區別于造血器官內的未成熟的血細胞或未被釋放入循環的血細胞。外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡稱PBL,主要是血液循環中的淋巴細胞,由T細胞和B細胞組成,其中T細胞(占70%~80%)和B細胞(占20%~30%)。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠外周血淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠外周血淋巴經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 外周血 | 產品貨號 | YS-01X7625 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 圓形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)試劑盒 ,英文名: cPLA2 ELISA Kit
Mouse beta amyloid (A beta 1-42 1-42) ELISA Kit 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒
ELISA 小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand) 進口分裝
CLIAKitforITF(HumanIestinalefoilfactor)ELISAKit人腸三葉因子
通用型丁酰酯酶活性比色法定量試劑盒20次
AIL-R3大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3
兔子白介素9(IL-9)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISAKit ELISA. 96T/48T
T細胞白血病淋巴瘤蛋白3抗體
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human P-selectin (omein) ELISA Kit 人網膜素(omein)試劑盒
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit 人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCathepsinK,cath-K試劑盒人組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒規格:96T/48T
轉基因油菜(canola)RF3品系試劑盒20次
Humansignalrecognizationpaicleaibody,SRPELISAKit人抗信號識別顆??贵w(SRP)試劑盒規格:96T/48T
聚磷酸肌醇磷酸酶5B抗體
CA14重組人 Carbonic Anhydrase XIV / CA14 蛋白 Protein
血管緊張素Ⅱ受體2(AGTR2)重組蛋白 Recombinant Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
GP1BB Protein Human 重組人 GP1BB / CD42c 蛋白
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽)
小鼠外周血淋巴細胞血管緊張素Ⅱ受體2(AGTR2)重組蛋白 Recombinant Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2)
GP1BB Protein Human 重組人 GP1BB / CD42c 蛋白
CA14重組人 Carbonic Anhydrase XIV / CA14 蛋白 Protein
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取