細胞簡介：

小鼠外周血DC分離自外周血，由外周血單核細胞誘導而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞，典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態不規則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內細胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導成的單核細胞，貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成，多數呈懸浮生長， 細胞呈圓形，細胞體積進一步增大，表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志，主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進而激活T淋巴細胞，誘導免疫應答，處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節；未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答，不能激活T細胞的第二信號，可導致T細胞無能，從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低，一般在30%以下。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的小鼠外周血樹突狀(未成熟DC細胞)經CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態等綜合鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁半懸浮

細胞形態：圓形、梭形、多角形，形態多樣

傳代特性：屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠外周血樹突狀(未成熟DC細胞)體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：

大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)試劑盒 ，英文名： PKCζ ELISA Kit

N cadherin / neural cadherin (N-Cad) ELISA Kit 人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad)試劑盒

RatIerleukin17,IL-17ELISAKIT 大鼠白介素17(IL-17)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforCXCR3(HumanCXC-chemokinereceptor3)ELISAKit人CXC趨化因子受體3

細胞色素P450亞酶CYP2E1(NPH)活性比色法定量試劑盒20次

RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISAKit大鼠脂酰合成酶(ACS)試劑盒規格：96T/48T

小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit   ELISA

小鼠轉化生長因子α(TGF-α)ELISAKit   ELISA

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit   ELISA

小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit   ELISA

白細胞抗原B相關轉錄蛋白5抗體

AF750標記的多巴胺轉運蛋白DAT抗體

NCSTN重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein

蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

VAMP3重組人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

IL10RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標簽)

A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

FGF21重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein

FGFR4 Protein Rat 重組大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白

CANT1重組人 CANT1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)小鼠糖皮質激素受體α(GR-α)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit 大鼠A(CsA)試劑盒

Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉錄因子(OTF2A)pcr檢測試劑盒分裝

Chickenα-Glucosidase,a-Glu試劑盒雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞αSMA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit小鼠(EPI)試劑盒規格：96T/48T