細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人直腸癌組織源分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見(jiàn)的一類(lèi)。相對(duì)應(yīng)的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說(shuō)的“癌癥”習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常、生長(zhǎng)失去控制、浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征，其發(fā)生是一個(gè)多因子、多步驟的復(fù)雜過(guò)程，分為致癌、促癌、演進(jìn)三個(gè)過(guò)程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細(xì)胞，是一種變異的細(xì)胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同，有無(wú)限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn)，能夠無(wú)限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織。癌細(xì)胞除了分裂失控外（能進(jìn)行多極分裂），還會(huì)局部侵入周?chē)＝M織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人直腸癌組織源經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)試劑盒 ，英文名： MMP9 ELISA Kit

Mouse ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)試劑盒

Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 大鼠αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFAS/CD95ELISAKit大鼠凋亡相關(guān)因子

細(xì)胞甲戊二羥酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量試劑盒20次

RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠趨化因子(mouse RAES)   作用：   ELISA 

小鼠抵抗素(mouse Resistin)   作用：   ELISA 

小鼠可溶性破骨細(xì)胞異化因子(mouse sRANKL)   作用：   ELISA 

小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA)   作用：   ELISA

ARCH抗體

小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin heavy chain (IgH) ELISA Kit 重鏈(IgH)試劑盒

HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Fishi-iodothyronine,T3試劑盒魚(yú)類(lèi)三甲狀腺原(T3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次

MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

溶質(zhì)載體家族蛋白20成員A1抗體

NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein

PSCA 前列腺干細(xì)胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細(xì)胞抗原

NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein

COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白

EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人直腸癌組織源細(xì)胞PSCA 前列腺干細(xì)胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細(xì)胞抗原

COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白

NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein

EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。