細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
人外周血B淋巴分離自外周血;B淋巴細胞的祖細胞存在于胎肝的造血細胞島中,此后B淋巴細胞的產生和分化場所逐漸被骨髓所代替。B淋巴細胞簡稱B細胞,成熟的B細胞主要定居于淋巴結皮質淺層的淋巴小結和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結內。B細胞在抗原刺激下可分化為漿細胞,漿細胞可合成和分泌抗體(免疫球蛋白),主要執行機體的體液免疫。與T淋巴細胞相比,它的體積略大。這種淋巴細胞受抗原刺激后,會增殖分化出大量漿細胞。漿細胞可合成和分泌抗體并在血液中循環。從骨髓來的干細胞或前B細胞,在遷入法氏囊或類囊器官后,逐步分化為有免疫潛能的B細胞。成熟的B細胞經外周血遷出,進入脾臟、淋巴結,主要分布于脾小結、脾索及淋巴小結、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小結中,受抗原刺激后,分化增殖為漿細胞,合成抗體,發揮體液免疫的功能。
方法簡介:
實驗室分離的人外周血B淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法結合磁珠分選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的人外周血B淋巴經CD19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 外周血 | 產品貨號 | YS-01X8304 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 圓形 |
培養信息:
培養基:基礎培養基,含IL-2、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態:圓形
傳代特性:不建議傳代
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人外周血B淋巴體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 試劑盒
Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人2(VD2)試劑盒
HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關血漿蛋白A(PAPP-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAF試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)試劑盒規格:96T/48T
桌面DNA清除溶液500毫升
Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)試劑盒規格:96T/48T
人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒 人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒 規格型號:96T/48T 人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒、人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人組織蛋白酶抗體試劑盒 人組織蛋白酶抗體試劑盒 規格型號:96T/48T 人組織蛋白酶抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人組織蛋白酶抗體試劑盒、人組織蛋白酶抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人組織蛋白酶K試劑盒 人組織蛋白酶K試劑盒 規格型號:96T/48T 人組織蛋白酶K試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人組織蛋白酶D試劑盒 人組織蛋白酶D試劑盒 規格型號:96T/48T 人組織蛋白酶D試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
eIF3s8蛋白抗體
豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒
HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 人落葉型天皰瘡抗體(PF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
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胱抑素C單克隆抗體
SPOCK1重組人 SPOCK1 / Testican 1 蛋白 (aa 21-429, His 標簽) Protein
SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine 0.5mgSPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱的酸性分泌蛋白抗原
CD36重組人 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein
IL2 Protein Human 重組人 IL2 / Interleukin-2 蛋白 (L35M, L36S, C142A)
RBP4 Protein Human 重組人 RBP4 蛋白
人外周血B淋巴細胞SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine 0.5mgSPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱的酸性分泌蛋白抗原
IL2 Protein Human 重組人 IL2 / Interleukin-2 蛋白 (L35M, L36S, C142A)
SPOCK1重組人 SPOCK1 / Testican 1 蛋白 (aa 21-429, His 標簽) Protein
RBP4 Protein Human 重組人 RBP4 蛋白
CD36重組人 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。