| 商品屬性:
組織來(lái)源 | 口腔黏膜組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7610 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 細(xì)胞介紹:
人口腔黏膜成纖維分離自口腔黏膜組織;口腔各壁都有黏膜覆蓋,口腔黏膜在組織學(xué)上由上皮和固有層組成,并借粘膜下層與深部組織相連。口腔粘膜的前方與唇部皮膚相連,后面與咽部粘膜相延續(xù),是消化道的前端,因此其結(jié)構(gòu)和功能具有皮膚和消化道粘膜的某些特點(diǎn)。人口腔黏膜成纖維細(xì)胞主要來(lái)自口腔黏膜固有層組織。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
| 方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔粘膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔粘膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
| 細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項(xiàng):
1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力,請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)試劑盒 ,英文名: CCK-8 ELISA Kit
Porcine fibrinogen (Fbg) ELISA Kit 豬血纖蛋白原(Fbg)試劑盒
ELISA 小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(mouse ACTH) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLPL(Mouselipoproteinlipase)ELISAKit小鼠脂蛋白脂酶
通用腺病毒穿梭載體5微克
ELISAKitIC雞傳染性鼻抗體
小鼠孕激素/孕(PROG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠降鈣素(CT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISAKit ELISA. 96T/48T
BAIAP2L2蛋白抗體
小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat muscarinic acetylcholine receptor (M-AChR) ELISA Kit 大鼠毒蕈堿型乙酰受體(M-AChR)試劑盒
Humanα-galactosidase,αGALELISAKit 人α半乳糖苷酶(αGAL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(Mouseai-IgEreceptoraibody)ELISAKit小鼠抗IgE受體抗體
飲料總?cè)樗岜壬ǘ吭噭┖?/span>20次
MouseIerleukin4,IL-4ELISAKit小鼠白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶2單克隆抗體
Spike重組人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 標(biāo)簽) Protein
TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽 0.5mgTGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽
PLK1重組人 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein
CD300E Protein Human 重組人 CD300E / IREM-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PECAM1 Protein Human 重組人 CD31 / PECAM1 蛋白
人口腔粘膜成纖維細(xì)胞TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽 0.5mgTGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽
CD300E Protein Human 重組人 CD300E / IREM-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Spike重組人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 標(biāo)簽) Protein
PECAM1 Protein Human 重組人 CD31 / PECAM1 蛋白
PLK1重組人 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein