人肺大靜脈內(nèi)皮細胞

| 商品屬性：

| 細胞介紹：

人肺大靜脈內(nèi)皮分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán)，才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。

| 方法簡介：

公司實驗室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細胞：將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)試劑盒 ，英文名： FAS ELISA Kit

Porcine myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 豬髓過氧化物酶(MPO)試劑盒

玉米特定基因序列(IVR)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforLTA(Humanlipoteichoicacids)ELISAKit人脂0壁酸

鐵成分比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIgA雞免疫球蛋白A

血管內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D)   作用：   ELISA  

血管內(nèi)皮生長因子 165(VEGF165)   作用：   ELISA  

血管內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R1)   作用：   ELISA  

血管內(nèi)皮生長因子受體 2(VEGF-R2)   作用：   ELISA

丙酮酸脫氫酶復(fù)合物X蛋白抗體

小鼠幽門螺桿菌抗體IgG(HP-IgG)試劑盒 96T/48T

Human granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 人顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒

HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit 人糖鏈抗原19-9(CA19-9)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor6-K-PG(Mouse6-keto-prostaglandin)ELISAKit小鼠6同前列腺素

引物設(shè)計合成和酶切位點分析1個基因

Mousemelanocyteaibody,MCAbELISAKit小鼠黑色素細胞抗體(MCAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Rubicon蛋白抗體

HA重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

rhEGF(rh-Epidermal growth factor 100ugrhEGF(rh-Epidermal growth factor)

CTHRC1重組人 CTHRC1 蛋白 Protein

CCL3 Protein Human 重組人 CCL3 / Mip1a 蛋白

HSPB1 Protein Human 重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白

人肺大靜脈內(nèi)皮細胞rhEGF(rh-Epidermal growth factor 100ugrhEGF(rh-Epidermal growth factor)

CCL3 Protein Human 重組人 CCL3 / Mip1a 蛋白

HA重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

HSPB1 Protein Human 重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白

CTHRC1重組人 CTHRC1 蛋白 Protein

| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用