細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌分離自冠狀動(dòng)脈組織；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈，起于主動(dòng)脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干，發(fā)自左主動(dòng)脈竇，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動(dòng)脈壁的主要細(xì)胞成分，細(xì)胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化，調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，對(duì)研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用。冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 冠狀動(dòng)脈 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7285 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)試劑盒 ，英文名： sIL-1RⅡ ELISA Kit
Rabbit telomerase (TE) ELISA Kit 兔子端粒酶(TE)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-7(mouse IL-7) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-5ELISAKit大鼠白介素5
通用型雞傳染性法氏囊病(InfectiousBursalDisease/Gumboro Disease;IBD)試劑盒 20次
ELISAKitIGFBP-2大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2
豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit ELISA.
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISAKit ELISA.
豬睪(T)ELISAKit ELISA.
豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISAKit ELISA.
FAHD1蛋白抗體
豬藍(lán)耳病(PRRS)試劑盒
Human basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)試劑盒
Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit 豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAMA(Mouseai-Monocyteaibody)ELISAKIT小鼠抗單核細(xì)胞抗體
血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性熒光定量試劑盒20次
polyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒
染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta 0.5mgTNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 壞死因子-β抗原
PBK重組人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
APOM Protein Human 重組人 APOM 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta 0.5mgTNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 壞死因子-β抗原
APOM Protein Human 重組人 APOM 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PBK重組人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
