細胞簡介:
大鼠精原分離自睪丸組織;睪丸呈微扁的卵圓形,表面光滑,覆蓋著鞘膜臟層;深部是質地堅韌的白膜,在睪丸后緣增厚并進入睪丸,形成睪丸縱膈,縱膈發出許多睪丸小隔深入睪丸實質,將實質分為睪丸小葉,數量約為100~200。每個小葉內約有2~4條生精小管,具有產生精子的作用;生精小管之間的結締組織中有睪丸間質細胞,具有產生雄激素的作用。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管),精直小管進入睪丸縱膈形成睪丸網,之后睪丸網發出12~15條輸出小管通過睪丸后上緣進入附睪。生精小管的生精上皮是精子產生的地方,由生精細胞和支持細胞構成,成人的生精小管有30~70cm長。精子的產生過程包括生精細胞的分化、支持細胞的作用、雄激素的調節等。生精細胞并不是一種細胞,它是多種細胞的統稱,包括精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、精子細胞、精子。前者依次發育分化為后者,且依次從生精上皮的基部到管腔面排列,終形成精子進入到管腔之中,并借助生精上皮外側的肌樣細胞的收縮作用向下一級管腔移動。精原細胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細胞經過多次有絲分裂而形成的細胞。原始的胚細胞經分化形成精原細胞,精原細胞經復制形成初級精母細胞,初級精母細胞經過減數第一次分裂后形成次級精母細胞,再經過減數第二次分裂形成精細胞。精細胞經過變形終形成精子。精原細胞屬于雄性生殖細胞的早期發育階段,能不斷地進行有絲分裂,增加細胞數量,并分化為精母細胞。精原細胞貼近基膜,細胞呈圓形,核大而圓,梁色深。精原細胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力,而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中,通過精原細胞的分裂和分化,由精原細胞產生精母細胞,進入成熟分裂,因而通過增殖可大大增加精母細胞的數量。按理論推算,一個精原細胞通過數次細胞分裂,可形成上百個初級精母細胞。但在生精過程早期,生精細胞很易發生變性,故實際上少于這個數字。在精原細胞的增殖過程中,有一部分Ad型精原細胞不再繼續分裂,而是保留下來,成為新的精原干細胞,因此通過增殖不僅能使精原干細胞不斷得到更新,且能使精原干細胞保持一定數量,從而使精子的產生持續地進行下去,不會枯竭。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠精原采用混合酶多步消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠精原經AP(堿性磷酸酶)免疫組化染色鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 睪丸 | 產品貨號 | YS-01X8238 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 圓形、橢圓形 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、GDNF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:圓形、橢圓形
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠精原體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
人脂肪酶(Lipase)ELISA 試劑盒
People of lipoxin A4 (LXA4) ELISA Kit 人脂氧素A4(LXA4)試劑盒
HumanNeuroglobin,NGBELISAKit 人腦紅蛋白(NGB)試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanHypotheticalproteinLOC677168試劑盒人假定蛋白LOC677168試劑盒規格:96T/48T
組織肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性比色法定量試劑盒25次
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)試劑盒規格:96T/48T
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)試劑盒 96T/48T
小鼠心肽(ANP)試劑盒 96T/48T
小鼠心肌轉錄因子GATA4試劑盒 96T/48T
小鼠心肌營養素1(CT-1)試劑盒 96T/48T
層粘連蛋白受體1抗體
小鼠(Cyt-C)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 人淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒
HumanAcetylcholinesterase,AChEELISAKit 人乙酰酯酶(AChE)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenImmunoglobulinG,IgG試劑盒雞免疫球蛋白G(IgG)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞CYP2B1蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒規格:96T/48T
腦膠質瘤發病機制相關蛋白1抗體
S100A4重組小鼠 S100A4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
肌原纖蛋白1(FBN1)重組蛋白 Recombinant Fibrillin 1 (FBN1)
STC2重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein
CDH16 Protein Human 重組人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 蛋白
NTRK1 Protein Canine 重組狗 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)
大鼠精原細胞肌原纖蛋白1(FBN1)重組蛋白 Recombinant Fibrillin 1 (FBN1)
CDH16 Protein Human 重組人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 蛋白
S100A4重組小鼠 S100A4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NTRK1 Protein Canine 重組狗 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)
STC2重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein