細胞簡介:
兔睪丸支持分離自睪丸;睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞,在體內呈不規則的高錐體形,細胞基部附著在基膜上,頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架,為其提供必需的營養物質,能合成與分泌雄激素結合蛋白,為其提供高濃度的雄激素環境等,還具有構成血-睪屏障,形成睪丸內微環境,調節發生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞,能分泌多種生長因子和免疫抑制因子,不僅可為提供營養支持和免疫保護,也能對其他細胞,如胰島和神經細胞提供營養支持,而且當其與胰島或神經細胞共移植時,也能夠為這些細胞提供免疫保護,提高植活率。因此,睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎研究有重要價值,而且在發生等領域有重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的兔睪丸支持采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔睪丸支持經Fas-L免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 睪丸 | 產品貨號 | YS-01X7858 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔睪丸支持體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠脂肪酸合酶(FASN)試劑盒 ,英文名: FASN ELISA Kit
Mouse soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)試劑盒
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT人結合珠蛋白/觸珠蛋白
比色法定量試劑盒20次
ELISAKitbFGF-6大鼠堿性成纖維細胞生長因子6
小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 96T/48T
小鼠0酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)試劑盒 96T/48T
小鼠淋巴細胞因子試劑盒 96T/48T
小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒 96T/48T
巨噬細胞炎性蛋白1β抗體
小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 9/ gelatinase B (MMP-9/G 大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/G
Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISAKit 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Hamstermaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAK倉鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞染色質免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)10次
MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒規格:96T/48T
腺苷高半胱水解酶3抗體
EPHB4重組小鼠 EphB4 / HTK 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii 0.5mgAnti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
UBE2L6重組人 UBCH8 / UBE2L6 蛋白 Protein
CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白
CD99 Protein Rat 重組大鼠 CD99 蛋白 (Fc 標簽)
兔睪丸支持細胞Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii 0.5mgAnti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白
EPHB4重組小鼠 EphB4 / HTK 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
CD99 Protein Rat 重組大鼠 CD99 蛋白 (Fc 標簽)
UBE2L6重組人 UBCH8 / UBE2L6 蛋白 Protein