細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠睪丸間質分離自睪丸組織;睪丸間質細胞成群分布在曲精小管之間,胞體呈圓形,橢圓形或不規則形,胞體較大,直徑約20μm,胞質呈嗜酸性,細胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,染色較淡,有1~2個核仁線粒體多,呈管嵴狀,無分泌顆粒。從青春期開始,睪丸間質細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質細胞刺激素(黃體生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促進的發生和男性生殖器官發育,以及維持性征和性功能。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠睪丸間質采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠睪丸間質經3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 睪丸 | 產品貨號 | YS-01X7915 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠睪丸間質體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)試劑盒 ,英文名: GP2 ELISA Kit
Mouse insulin like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)試劑盒
RatAmylinELISAKit 大鼠胰淀素(Amylin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGelsolinELISAKit大鼠凝溶膠蛋白
細胞甘油三酯(iglyceride)含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次
Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14ELISAKit大鼠可溶性CD14(sCD14)試劑盒規格:96T/48T
小鼠癌標志物CA125ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠癌標志物-CA153ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胃腸癌標志物CA199ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
MAP激酶激活死亡域蛋白2C抗體
小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human platelet aibody IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒
Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit 人泛素分解酶(DUB)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforABP(HumanAndrogenBindingProtein)ELISAKit人雄激素結合蛋白
合成酶(NOS)總活性終點比色法定量試劑盒50/100次
MouseN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKit小鼠N端前腦素(-proBNP)試劑盒規格:96T/48T
減數分裂重組蛋白SPO11抗體
HA重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 0.5mgPAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子
ICOSLG重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 Protein
ESM1 Protein Human 重組人 ESM1 / Endocan 蛋白
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠睪丸間質細胞PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 0.5mgPAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子
ESM1 Protein Human 重組人 ESM1 / Endocan 蛋白
HA重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽)
ICOSLG重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取