細胞簡介:
小鼠冠狀動脈平滑肌分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優勢型、均衡型、左優勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為一短干,發自左主動脈竇,經肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分,細胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化,調節血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養的冠狀動脈平滑肌細胞,對研究生理和病理狀態下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 冠狀動脈 | 產品貨號 | YS-01X7284 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)試劑盒 ,英文名: GUSβ ELISA Kit
Mouse heme oxygenase 2 (HO-2) ELISA Kit 小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒
Ratniicoxidesyhase,NOSELISAKit 大鼠合成酶(NOS)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforGP-II(MouseGlycogenphosphorylaseII)ELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶II
細胞蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量試劑盒20次
RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit大鼠組織多肽抗原(TPA)試劑盒
小鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸(AcSDKP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠N端前腦素(-proBNP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
DALRD3蛋白抗體
小鼠骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒
Human growth hormone binding protein (GHBP) ELISA Kit 人生長激素結合蛋白(GHBP)試劑盒
HumanSecretinELISAKit 人促胰液素/胰泌素(Secretin)試劑盒 進口分裝
Humanai-respiratorysyncytialvirusaibody,RSV試劑盒人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)試劑盒
植物細胞葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
Humaumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit人壞死因子α(TNF-α)試劑盒
肝細胞生長因子激活物抑制劑/HGFA Inhibitor 1抗體
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
SFRP1(Secreted frizzled related protein 1 0.5mgSFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相關蛋白1抗原
FUT10重組人 FUT10 / Fucosyltransferase 10 蛋白 (His 標簽) Protein
FAM20B Protein Human 重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白
IL2RB Protein Human 重組人 CD122 / IL-2RB 蛋白
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞SFRP1(Secreted frizzled related protein 1 0.5mgSFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相關蛋白1抗原
FAM20B Protein Human 重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
IL2RB Protein Human 重組人 CD122 / IL-2RB 蛋白
FUT10重組人 FUT10 / Fucosyltransferase 10 蛋白 (His 標簽) Protein