| 商品屬性:
組織來源 | 冠狀動脈 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | YS-01X7748 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
| 細胞介紹:
大鼠冠狀動脈成纖維分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細胞成分,細胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復(fù)極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
| 方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈成纖維采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
| 細胞培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項:
1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題,責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠γ干擾素(IFNγ)試劑盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit
Rabbit soluble P selectin (sP-s 兔子可溶性P選擇素(sP-s
ELISA 小鼠巨嗜細胞性蛋白-1a(mouse MIP-1a/CCL3) 進口分裝
CLIAKitforIL-18ElisaKit大鼠白介素18
通用型鯉魚春季病毒血癥(SpringViraemiaofCarp;SVC)試劑盒20次
ELISAKitHO-2大鼠血紅素氧合酶2
豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit ELISA.
豬白介素13(IL-13)ELISAKit ELISA.
豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISAKit ELISA.
豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAkit ELISA.
PAPLN蛋白多糖樣硫酸化糖蛋白抗體
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)試劑盒
Human basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)試劑盒
PorcineMethemoglobin,MHBELISAKit 豬高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAmAC-1(HumanAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1)ELISAKit人巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1
血液果糖-1,6-二0酸縮酶(ALD)定量試劑盒20次
PorcineActivinA,ACV-AELISAKit豬活化素A(ACV-A)試劑盒
同源盒基因HOXA3蛋白抗體
TNFRSF1B重組小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein
ATM(ataxia telangiectasia mutated 0.5mgATM(ataxia telangiectasia mutated) 毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗原
TPO重組人 Thyroid peroxidase / TPO 蛋白 (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr, His 標簽) Protein
APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 40 / Beta-APP40 蛋白 (His & GST 標簽)
CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標簽)
大鼠冠狀動脈成纖維細胞ATM(ataxia telangiectasia mutated 0.5mgATM(ataxia telangiectasia mutated) 毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗原
APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 40 / Beta-APP40 蛋白 (His & GST 標簽)
TNFRSF1B重組小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein
CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標簽)
TPO重組人 Thyroid peroxidase / TPO 蛋白 (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr, His 標簽) Protein