產品內容：
酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存
試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；
試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；
試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
產品屬性：
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63491 |
商品介紹：
測定意義
PFK（EC 2.7.1.11）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，負責將果糖-6-磷酸和ATP轉化為果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解過程的關鍵調節酶之一。
測定原理
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PFK活性。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項：
1、公司產品僅用于科研操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應當乘以稀釋倍數。
操作步驟：
一、NAD+和 NADH 的提取：
1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。
NADH 的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
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PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法乙汞 分析標準品（劇品）氟化鋁 99.9% metals basisAnti-phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激alpha抑制劑抗體IgG
2,4,6-三(二甲基) 95%氟鋁銨 98%Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激alpha抑制劑抗體IgG
三叔丁氧基氫化鋁鋰 97%乙鈷，四水 99.9% metals basisAnti-Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激alpha/beta抑制劑抗體IgG
氫化鋰 95%硫鈷，七水 AR，99.5%Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激alpha/beta抑制劑抗體IgG
氫化鋰 2.0M四溶液硫鈷，七水 99.99% metals basisAnti-phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激beta抑制劑抗體IgG
三仲丁基氫化鋰 1M THF溶液式碳鎳 ARAnti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激beta抑制劑抗體IgG
三叔丁氧基氫化鋁鋰 1.0 M in THF鄰二甲酰亞 99%Anti-phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激beta抑制劑抗體IgG
綠原 95%1,3,5- CP,97%Anti-IL-4/FITC 熒光標記白介4抗體IgG
