產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
ACO順烏頭酸酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63481 |
商品介紹:
測定意義
順烏頭酸酶(aconitase),三羧酸循環中的酶,催化檸檬酸轉變為異檸檬酸。檸檬酸本身不易氧化,在順烏頭酸酶作用下,通過脫水與加水反應,使羥基由β碳原子轉移到α碳原子上,生成易于脫氫氧化的異檸檬酸,為進一步的氧化脫羧反應作準備。
測定原理
ACO催化檸檬酸轉化成異檸檬酸,異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH,導致340nm處光吸收上升。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產品內容:
公司產品僅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
下列是公司正在熱銷的產品:
EB病清道夫受體BEBV
磷化信號轉導和轉錄激活因子3肽BPhospho-Stat3
HLAⅡ類組織相容性抗原,DPα1鏈抗菌肽HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain
主要組織相容性復合體Ⅱ類顆粒溶major histocompatibility complexⅡ
蘋果脫氫2富組蛋白Malate Dehydrogenase2
前列腺E合2球蛋白樣轉錄體受體Prostaglandin E Synthase 2
γ谷酰轉肽絲狀血球凝集gamma glutamyl transpeptidase
白細胞介6絨毛蛋白/埃茲蛋白Interleukin 6
透明質嗜環蛋白/親環AHyaluronic acid
Ⅳ型膠原肌養蛋白Collagen TypeⅣ
磷烯醇式丙酮羧激膠原凝集phosphoenolpyruvate carboxykinase
果糖-1,6-二磷伴侶蛋白10Fructose-1,6-Bisphosphatase
葡萄糖-6-磷纖調蛋白Glucose-6-phosphatase, catalytic
糖原合成鈣網蛋白Glycogen synthase
趨化因子配體3網膜ELISA Kit for ChemokineLigand 3
ACO順烏頭酸酶檢測試劑盒微量法乙鈉 98%穗花牡荊甙 分析標準品,≥98% Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體
硫代甜菜 12 98%桃葉珊瑚苷 分析標準品,≥98%Anti-Lysozyme 溶菌抗體
十二烷基硫鈉 97%,電泳白果內酯 分析標準品,≥99%Anti-Lyn 膜相關蛋白酪激Lyn抗體
十二烷基硫鈉 99.0%,超純級巴卡丁 III 分析標準品,≥99%Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關蛋白酪激Lyn抗體
硫代甜菜 8 98%松果菊苷 分析標準品,≥95% Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體
硫代甜菜10 98%雪上一枝蒿甲 分析標準品,≥97%Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體
二甲藍FF 80%雪上一枝蒿乙 分析標準品,≥98%Anti-LYVE-1 管內皮透明質受體抗體
10.0μL微量進樣器 尖頭菊苣 分析標準品,≥98%Anti-M2-PK/PKM2 酮激-M2抗體
注意事項:
1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應當乘以稀釋倍數。