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原代細胞實驗中過失的方法

2017年11月01日 10:03上海邦景實業有限公司點擊量:215

原代細胞實驗中過失的方法:
1、檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。
2、操作前仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規范化操作。
3、評估試劑盒的實用性,試劑盒的穩定與否,對準確率的高低很重要。
4、加樣要準確、快速。
5、使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。
6、嚴格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現假陰性。
7、洗滌*,洗板不*,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。
8、嚴控反應時間,反應時間過長,酶失活,反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
實驗過程必知小知識:
① 建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
② 若顯色過淺,可適當延長底物溫育時。
③ 實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
④ 酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標本宜在新鮮時檢測,如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應,保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結標本溶解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。
⑧ 反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
原代細胞HK tRNA    人角膜細胞總RNA    10 µg
HRPEpiC tRNA    人視網膜色素上皮細胞總RNA    10 µg
HLEpiC tRNA    人晶狀體上皮細胞總RNA    10 µg
HIPEpiC tRNA    人虹膜色素上皮細胞總RNA    10 µg
HConF tRNA    人結膜成纖維細胞總RNA    10 µg
HNPCEpiC tRNA    人無色素睫狀上皮細胞總RNA    10 µg
HTMC tRNA    人小梁網細胞總RNA    10 µg
HAmEpiC tRNA    人羊膜上皮細胞總RNA    10 µg
HVT tRNA    人滋養層絨毛細胞總RNA    10 µg
HVMF tRNA    人絨毛間葉成纖維細胞總RNA    10 µg
HPA-v tRNA    人前脂肪細胞-內臟總RNA    10 µg
HPA-s tRNA    人前脂肪細胞-皮下總RNA    10 µg
HMSC-bm tRNA    人間充質干細胞-骨髓總RNA    10 µg
HMSC-ad tRNA    人間充質干細胞-脂肪總RNA    10 µg
HMSC-hp tRNA    人間充質干細胞-肝臟總RNA    10 µg
HUMSC tRNA    人臍帶間充質干細胞總RNA    10 µg
HPMSC tRNA    人肺間充質干細胞總RNA    10 µg
HMEpiC tRNA    人上皮細胞總RNA    10 µg
HMF tRNA    人成纖維細胞總RNA    10 µg
HUVEC tRNA    人臍靜脈內皮細胞總RNA    10 µg
HUAEC tRNA    人臍動脈內皮細胞總RNA    10 µg
HUVSMC tRNA    人臍靜脈平滑肌細胞總RNA    10 µg
HUASMC tRNA    人臍動脈平滑肌細胞總RNA    10 µg
HBMEC miRNA    人腦微血管內皮細胞微小RNA    1 µg
HBCSMC miRNA    人腦血管平滑肌細胞微小RNA    1 µg
HBVP miRNA    人腦血管周細胞微小RNA    1 µg原代細胞

 

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