細(xì)胞簡介：
大鼠肺泡巨噬分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲(chǔ)存器官，為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺泡巨噬采用PBS灌注結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺泡巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 肺組織 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7483 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 （12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠谷酸脫羧酶1(GAD1)試劑盒 ，英文名： GAD1 ELISA Kit
Rabbit leukoiene B4 (LTB4) ELISA Kit 兔子白三烯B4(LTB4)試劑盒
致病性大腸桿菌(EPEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitformIgA(HumanmembraneIgA)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白A
體液賴羥化酶(lysylhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitACAC牛乙酰乙酸檢測(cè)
豬胰島素樣生長因子 英文名稱： Porcine Insulin-like Growth Factor-1 英文縮寫： IGF-1
豬生長激素 英文名稱： Porcine Growth Hormone 英文縮寫： GH
豬狀腺原酸 英文名稱： Porcine Total iiodothyronine 英文縮寫： TT3
豬甲狀腺素 英文名稱： Porcine Total Thyroxine 英文縮寫： TT4
AF647標(biāo)記的腫瘤壞死因子抗體
豬血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒
Human myogenin (MYOG) ELISA Kit 人肌細(xì)胞生成素(MYOG)試劑盒
RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforai-PIVIgM(Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody)ELISAKit人抗副流感病毒IgM抗體
血液5’-核苷酸酶(5’-)活性比色法定量試劑盒20次
PorcineImmunoglobulinM,IgMELISAKit豬免疫球蛋白M(IgM)試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體
RSPO1重組小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
分泌跨膜蛋白1(SECTM1)重組蛋白 Recombinant Secreted And Transmembrane Protein 1 (SECTM1)
LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
CD3E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞分泌跨膜蛋白1(SECTM1)重組蛋白 Recombinant Secreted And Transmembrane Protein 1 (SECTM1)
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
RSPO1重組小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD3E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
