小鼠肺組織提取物 【Mouse Lung: Normal Lung Derivatives】
小鼠肺位于胸腔內(nèi),主要包含內(nèi)皮,上皮,成纖維三種細(xì)胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠肺組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
小鼠肺組織提取物培養(yǎng) | Mouse Lung: Normal Lung Derivatives | EYX99385 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
細(xì)胞培養(yǎng)方法;
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
實驗事項;
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項;
1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
IL4(human、his標(biāo)簽)0ug8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal5142
IL6(human、his標(biāo)簽)0ug8-Hydroxy-iodo-quinolinesulfonic acid5471喹方
EGFP熒光蛋白0ug/1mg8-Bromo-(but-yn-yl)-methylH-purine,6(3H,7H)-dione6668168
0bp DNA ladder(00bp) 0次8-Azaguanine13488-氮雜鳥嘌呤
0bp plus DNA ladder(0000bp)0次8-Anilino-naphthalenesulfonic acid8268-苯胺-萘磺酸
Deoxylapachol 中文名: 分子式:C15H14O2 度:97.0% 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit
9-Hydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O4 度:96.0% 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒
Dehydro-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H12O3 度:97.5% 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA試劑盒
α-Lapachone 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0% 兔壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
9-Methoxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C16H16O4 度:% 兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
茜素黃GG Alizarin yellow GG 質(zhì)量規(guī)格:IND 酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖+棉籽糖)100毫升
茜素黃R Alizarin yellow R 質(zhì)量規(guī)格:IND 酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升
鋁試劑,玫紅三羧酸銨 Aluminon 質(zhì)量規(guī)格:AR 酵母菌YNBA培養(yǎng)基100毫升
鋁試劑 Aluminon 質(zhì)量規(guī)格:ACS 酵母菌YNB培養(yǎng)基100/500毫升
酸性鉻藍(lán)K Acid chrome blue K 質(zhì)量規(guī)格:指示劑級 酵母菌YPD培養(yǎng)基100毫升
酸性品紅 Acid Fuchsin 質(zhì)量規(guī)格:BS 酵母菌YPD培養(yǎng)基500毫升
茜素絡(luò)合指示劑(IND) Alizarin complexone 質(zhì)量規(guī)格:IND 酵母菌斑雜交試劑盒10
茜素絡(luò)合指示劑(高級,98%) Alizarin complexone 質(zhì)量規(guī)格:高級,98% 酵母菌落直接PCR檢測試劑盒20
偶氮胂 I Arsenazo I 質(zhì)量規(guī)格:AR 酵母菌*補(bǔ)充混合(CSM)培養(yǎng)基100毫升
堿性品紅(生物染色級) Basic Fuchsin 質(zhì)量規(guī)格:BS(生物染色級) 酵母菌*補(bǔ)充混合(CSM-BRE)培養(yǎng)基100毫升
小鼠肺組織提取物培養(yǎng)可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 8-Azaguanine 中文名:8-氮雜鳥嘌呤 分子式:C4H4N6O
兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit 8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione 中文名: 分子式:C10H9BrN4O2 度:98.0%
兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone 58113-30-7 中文名: 分子式:C12H15ClO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol 中文名: 分子式:C13H11ClF3NO 度:98.0%
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3 度:% 關(guān)鍵詞: 抗癌; 麥角甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫