細胞簡介:
小鼠肺動脈平滑肌分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經肺門入肺。肺動脈干位于心包內,為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺動脈平滑肌細胞是肺血管的重要結構細胞之一,在調控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。肺動脈平滑肌細胞的異常是肺動脈高壓發生發展的重要病理學特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進肺動脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發生發展。肺動脈平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺動脈平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠肺動脈平滑肌采用 - 膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠肺動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 肺動脈 | 產品貨號 | YS-01X8180 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠肺動脈平滑肌體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠白介素9(IL-9)試劑盒 ,英文名: IL-9 ELISA Kit
Mouse ierleukin 12 (IL-12/P70) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒
ELISA 小鼠GRO(mouse GRO) 進口分裝
CLIAKitfori-PTH(HumaniactParathormone)ELISAKit人全段甲狀旁腺素
通用型非蛋白/游離巰基含量熒光定量試劑盒20次
ELISAKitLBP大鼠脂多糖結合蛋白
小鼠白介素-23(mouse IL-23) 作用: ELISA
小鼠白介素-27(mouse IL-27) 作用: ELISA
小鼠胰島素(mouse Insulin) 作用: ELISA
小鼠抑制素A(mouse Inhibin A) 作用: ELISA
1號染色體開放閱讀框57抗體
小鼠肌肉素/肌抑素(MSTN)試劑盒 96T/48T
Rat Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒
Humandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit 人降解加速因子(DAF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-livercellmembraneaibody,LMA試劑盒人抗肝細胞膜抗體(LMA)試劑盒規格:96T/48T
植物膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20次
HumanVaricellazostervirusIgG,VZV-IgGELISAKit人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)試劑盒規格:96T/48T
磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體
RETN重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標簽) Protein
白細胞關聯免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)重組蛋白 Recombinant Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2 (LAIR2)
MERTK重組人 MERTK / Mer (aa 578-872) 蛋白 Protein
EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白
REG1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠肺動脈平滑肌細胞Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 0.5mgAnnexin A 膜粘連蛋白 A抗原
EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白
JAM2重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 (Fc 標簽)
ADIPOQ重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標簽) Protein