人肺大靜脈組織提取物【Lung: Normal Human Lung Vein Derivatives】

肺位于胸腔內，主要包含內皮，上皮，成纖維三種細胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍人肺大靜脈組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

λ DNA0μg 3β-Hydroxyergost-en-one1567679

Anti-c-Myc抗體   μl 3β-Acetoxyα-androstan7β-ol03-乙酰基α-雄烷二醇

Anti-Flag抗體   μl 3β,5α-Dihydroxyergosta,22-dien-one148587

Anti-GST單克隆抗體   μl 3β,5α,9α-Trihydroxyergosta,22-dien-one881914

Anti-His單克隆抗體   μl3-tert-Butoxycarbony-(4-anisyl)-phenyl-oxazolidinecarboxylic acid19645
Estrone  53-16-7  中文名：雌酮  分子式：C18H22O2    HumanPepsin，PPELISAKit人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Cynatratoside A  97399-96-7  中文名：白薇苷A  分子式：C28H40O8    兔子巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Sprengerinin A  88866-99-3  中文名：  分子式：C38H60O12    Human signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 人信號轉導分子7(Smad7)ELISA試劑盒

Sprengerinin C  88861-91-0  中文名：  分子式：C44H70O16    Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/ai-RA33-aibody,hNP/RA33ELISAKit 人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Prosapogenin A  19057-67-1  中文名：薯蕷次皂苷A  分子式：C39H62O12    Humanendomorphin-2,EM-2ELISA試劑盒人內肽-2(EM-2)ELISA試劑盒規格：96T/48T
沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽  Saxagliptin HCL  質量規格：>98%,BR 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 Rat granzymes A,Gzms-A ELISA Kit

表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG95%）  EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract  質量規格：茶多酚≥98%，EGCG≥95%，≤0.1% 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA檢測試劑盒RatgranzymesB,Gzms-BELISAKit 96T/48T

達沙替尼一水合物  Dasatinib Monohydrate  質量規格：>99%,BR,可用于細胞培養  大鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒 Rat granzymes B,Gzms-B ELISA Kit

依西美坦  Exemestane (USP)  質量規格：>99%,USP,Aromatase inhibitor 大鼠可溶性CD14(sCD14)試劑盒 Rat soluble cluster of differeiation 14,sCD14 ELISA Kit

依西美坦(標準品)  Exemestane  質量規格：>99%,標準品 大鼠可溶性CD23(sCD23)試劑盒 Rat soluble CD23,sCD23 ELISA Kit

  Amidopyrine/aminopyrine  質量規格：>98%,AR 大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit

血管緊張素II  Angiotensin II  質量規格：>98.0%,BR 大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit

維生素 D3 ((膽骨化醇)  Vitamin D3  質量規格：>98.0%(HPLC)4000萬IU/g 大鼠可溶性CD80(sCD80)試劑盒 Rat Soluble Cluster of Differeiation 80,sCD80 ELISA Kit

帕唑帕尼鹽酸鹽  Pazopanib HCl  質量規格：>99%,BR,可用于細胞培養  大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒 Rat soluble Cluster of differeiation 86,sCD86 ELISA Kit

噻托銨  Tiotropium bromide anhydrous   質量規格：>97%,BR,無水物 大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 Rat soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit
人肺大靜脈組織提取物兔固（ALD）ELISA試劑盒     5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%

兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit     4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4  度：%  關鍵詞：  紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體elisa試劑盒   兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒   規格型號：96T/48T   兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  關鍵詞：  千里光; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3  度：98.0%  關鍵詞： 

兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝     6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。