土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒注意：正式測定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體 65mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃保存；
產(chǎn)品說明:
S-LAP 是一類能水解肽鏈 N-末端為亮氨/酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP 活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
S-LAP 分解 L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺，后者在 405nm 有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計(jì)算 S-LAP 活性。
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
S-LAP測定步驟：
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 405nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在試劑二瓶中加入 30mL 試劑一充分溶解（如較難溶解，可 60℃水浴加熱約 30min 促進(jìn)溶解）；在 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
3、操作表
試劑名稱 | 對(duì)照管 | 測定管 |
新鮮土樣（g） | 0.2 | 0.2 |
試劑一（μL） | 1200 | |
試劑二（μL） | 1200 |
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒混勻， 37℃振蕩反應(yīng) 1h 后，8000g 4℃離心 10min，取 1mL 上清液于比色皿中，405nm 處測定吸光值 A，計(jì)算ΔA=A 測定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-LAP 活力單位的計(jì)算：
單位的定義：每天每 g 土樣每天生成 1 μmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
S-LAP（μmol/d /g 土樣）＝ΔA×V 反總÷（ε×d）×106÷W÷T=14.8×ΔA
V 反總：反應(yīng)體系總體積，1.2×10-3 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm； d：比色皿光徑，1cm；T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d； W：樣本質(zhì)量，0.2g。
注意事項(xiàng)：
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒當(dāng)?A 大于 1 時(shí)，建議將上清液稀釋后進(jìn)行測定；當(dāng)?A 小于 0.01 時(shí)，建議延長反應(yīng)時(shí)間。計(jì)算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)或注意反應(yīng)時(shí)間變化。
