1. 簡(jiǎn)介： 

膳食纖維是指碳水化合物及其相類似物質(zhì)的總和，包括多糖、寡糖、木質(zhì)素以及相關(guān)的植物物質(zhì)。主要有纖維素、半纖維素、果膠及親水膠體物質(zhì)，如樹(shù)膠、海藻多糖等組分；另外還包括植物細(xì)胞壁中所含有的木質(zhì)素；不被人體消化酶所分解的物質(zhì)，如抗性淀粉、抗性糊精、抗性低聚糖、改性纖維素、黏質(zhì)、寡糖以及少量相關(guān)成分，如蠟紙、角質(zhì)、軟木脂等。 總膳食纖維檢測(cè)試劑盒是根據(jù)AOAC991.43，AOAC 985.29，AACC32-07和AACC 32-05方法開(kāi)發(fā)的，也適用于其它方法，如AACC Method 32-21，AACC method32-06。
2. 檢測(cè)原理 :

脫脂（如大于10%）干燥后的樣品經(jīng)熱穩(wěn)定a-淀粉酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化，酶解液通過(guò)乙醇沉淀、過(guò)濾，乙醇和丙酮洗滌殘?jiān)蟾稍铩⒎Q重，得到總膳食纖維（TDF）殘?jiān)?酶解液通過(guò)直接過(guò)濾、熱水洗滌殘?jiān)稍锖蠓Q重，得到不溶性膳食纖維（IDF）殘?jiān)?濾液用乙醇沉淀，過(guò)濾、干燥、稱重，得到可溶性膳食纖維（SDF）殘?jiān)?TDF、IDF和SDF的殘?jiān)鄢鞍踪|(zhì)、灰分和空白即得TDF、IDF和SDF含量。 該檢測(cè)試劑盒的主要優(yōu)勢(shì)在于直接提供高純度的酶，酶的活力是標(biāo)準(zhǔn)化的，而標(biāo)準(zhǔn)化的a-淀粉酶的活力在測(cè)量抗性淀粉是*的。 淀粉葡萄糖苷酶中基本沒(méi)有纖維素酶，而其他常用的酶制劑中常含有這種污染物，這將導(dǎo)致溶解和低估β-葡聚糖。 該試劑盒提供的酶都是穩(wěn)定的液體，可以保存到試劑盒有效期，并且是直接應(yīng)用液，不需要使用前再溶解。 
3. 用途:

適用于檢測(cè)谷物、水果、蔬菜和加工食品中的總膳食纖維（TDF）、不溶性 膳食纖維（IDF）和可溶性膳食纖維（SDF）的檢測(cè)。
4. 提供試劑及材料:

每一個(gè)盒中的提供的酶試劑足夠進(jìn)行200個(gè)試驗(yàn)，如另外需要可單獨(dú)訂貨： Bottle 1 ，1瓶： 熱穩(wěn)定a-淀粉酶（20mL，~ 3,000 U/mL，Ceralpha method；~ 10,000 U/mL on soluble starch。). Bottle 2，1瓶： 純化的蛋白酶(20mL，50 mg/mL; ~ 350 tyrosine Units/mL。) Bottle 3，2瓶: 淀粉葡萄糖苷酶(20mL，3300 U/mL on soluble starch。) 總計(jì)：80ml（4瓶20ml包裝） 另外，實(shí)驗(yàn)中需要用到硅藻土： 酸洗硅藻土Celite?545，100g或500g包裝，（貨號(hào)：G-CEL100，G-CEL500) 其他相關(guān)試劑盒：

膳食纖維質(zhì)控試劑盒（貨號(hào)：K-TSCK） 質(zhì)控試劑盒用于檢驗(yàn)酶的效力和純度，含下表中所列物質(zhì)每種一瓶，并附有技術(shù)數(shù)據(jù)單(K-TSCK)，盒中每種物質(zhì)足夠10次測(cè)試用。 

品種 數(shù)量 β-葡聚糖（大麥） 1.0g 高直鏈玉米淀粉 10.0g 淀粉（小麥） 10.0g 酪蛋白 5.0g 果膠 1.0g 5. 需要的設(shè)備和試劑 

5.1 設(shè)備 

A. 高型無(wú)導(dǎo)流口燒杯：400mL或600mL 

B. 坩堝：具粗面燒結(jié)玻璃板，孔徑40-60 μm。清洗后在馬福爐中525℃灰化6小時(shí)或過(guò)夜，用真空泵除去硅藻土和灰分，室溫下用2%清洗液浸泡1小時(shí)，用水和蒸餾水沖洗干凈，用15 mL丙酮沖洗后風(fēng)干，加1g硅藻土到干燥的坩堝中，在130℃干燥至恒重，在干燥器中冷卻1小時(shí)，記下坩堝（包括硅藻土）的重量。 

C. 真空溶劑過(guò)濾裝置：真空泵或有調(diào)節(jié)裝置的抽吸器，1L的抽濾瓶，側(cè)壁有抽濾口，以及抽濾瓶配套的橡膠塞。用于酶解液的抽濾。 

D. 恒溫振蕩水浴：95-100℃ 

E. 分析天平：感量0.1mg 

F. 天平（臺(tái)秤）：4 000g量程，感量0.1g 

G. 馬福爐：525±5°C， 

H. 烘箱：103±2℃，130±3℃ 

I. 真空干燥箱 

J. 干燥器：二氧化硅或等同干燥劑 

K. PH計(jì)，具有溫度補(bǔ)償功能。 

L. 微量凱氏定氮儀。 

M. 移液器，50-200 μL，5 mL，一次性移液吸頭。 

N. 計(jì)時(shí)器。 

O. 橡膠刮勺 

P. 磁力攪拌器 

5.2 試劑 

A. 95%乙醇（體積比），

B. 78 %乙醇：取821mL95%乙醇置于容量瓶中，用水稀釋到刻度，混勻。

C. 丙酮 

D. 蒸餾水或去離子水 

E. 清洗液Micro (International Products Corp.,Trenton,NJ).，配成2%液體 

F. MES/TRIS緩沖液（0.05mol/L）:稱取19.52g (MES) (Sigma, M 8250)和14.2 g (TRIS) (Sigma,T1503)