土壤有效硼試劑盒-可見分光光度法注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
土壤中有效硼直接影響著植物的吸收和利用。
測定原理
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物,在420nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、常溫離心機、震蕩儀、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿。
土壤有效硼試劑盒-可見分光光度法試劑組成和配制
試劑一:液體 1mL×1 支,4℃保存。
試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 10mL 蒸餾水溶解。
樣本處理
新鮮土樣風干,過100目篩,按照土壤質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:2的比例(建議稱取約0.5g土樣,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,沸水中浸提10min,待自然冷卻,加入50μL試劑一,震蕩5min,8000g ,25℃離心10min,取上清液待測。
土壤有效硼試劑盒-可見分光光度法測定操作表
空白管 | 測定管 | |
樣本(μL) | 200 | |
試劑二(μL) | 400 | 400 |
試劑三(μL) | 200 | 200 |
H 2 O(μL) | 400 | 200 |
充分混勻,25℃黑暗中靜置 1h | ||
于1mL玻璃比色皿,蒸餾水調零,測定420nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測定管, △A=A 測定管-A 空白管 |
土壤有效硼試劑盒-可見分光光度法計算公式
標準曲線:y=0.3897x-0.2359,R2=0.9995
全鐵含量(mg/kg)=(△A+0.2359)÷0.3897×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 51.32×(△A+0.2359)÷W
V 反總:反應總體積,1mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.2mL;V 樣總:加入提取液體積,4mL,W:樣本質量,g
注意事項
1. 配制好的試劑二 4℃保存不可超過 7 天。
2. 顯色時嚴格控制溫度并且避光,以免顯色劑見光分解。