土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)試劑盒-微量法注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。
產(chǎn)品簡介：
S-β-GC 能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶系中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。
S-β-GC 能夠催化對-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯fen，產(chǎn)物略顯黃色，在 400nm 有特征光吸收。
土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)試劑盒-微量法試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 13mL 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑三：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
標準品：液體×1 支，5mmol/L 的對硝基苯fen溶液。標準樣品的準備：
取 100μL 標準液，加入到 400μL 試劑三中，得到 1mmol/L 標準液，十倍稀釋到 100 μmol/L， 用蒸餾水倍比稀釋：50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L 做標準液。
土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)試劑盒-微量法操作步驟：
1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 400nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 標準管 | 空白管 |
風干土樣（g） | 0.02 | 0.02 | - | - |
試劑一（μL） | 10 | 10 | - | - |
振蕩混勻，使土樣全部濕潤，室溫放置 15min | ||||
試劑二（μL） | 130 | - | - | - |
試劑三（μL） | 160 | 160 | - | - |
混勻，37℃水浴 1h 后，立即沸水浴煮沸 5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻 | ||||
試劑二（μL） | - | 130 | - | - |
充分混勻，10000g 常溫離心 10min，取上清液 | ||||
上清液（μL） | 70 | 70 | - | |
標準液（μL） | - | - | 70 | |
蒸餾水（μL） | - | - | - | 70 |
試劑四（μL） | 130 | 130 | 130 | 130 |
充分混勻，室溫靜置 2min 后，測定吸光值 A，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設(shè)一個對照管。標準曲線建立：根據(jù)標準管的濃度（y）和吸光度ΔA=A 標準管-A 空白管（x），建立標準曲線。
土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)試劑盒-微量法S-β-GC 活力的計算：
根據(jù)標準曲線，將ΔA（x）帶入公式計算樣品濃度（μmol/L）。
單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μmol 對-硝基苯fen定義為一個酶活力單位。
S-β-GC 活力（U/g 土樣）＝y(tǒng)×V 反總÷W÷T=0.36×y
T：反應(yīng)時間，1h=1/24d；V 反總：反應(yīng)體系總體積：3×10-4L；W：樣本質(zhì)量，0.02g。
