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細胞株檢驗方法

2017年10月27日 09:59上海邦景實業(yè)有限公司點擊量:240

細胞株檢驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
注意事項
1. 在使用前,一抗二抗均應(yīng)測試其合適的稀釋度。
2. 多聚甲醛的固定是不穩(wěn)定的,標本經(jīng)多聚甲醛固定后,應(yīng)再用去污劑處理,如果標本在水溶液中浸泡的時間過長,則會使交聯(lián)結(jié)構(gòu)解體。因此,應(yīng)避免固定后的標本在水溶液中浸泡的時間過長。
3. 信號微弱的解決方法:
① 提高一抗和二抗的濃度以增強敏感性 ,這必須測試各種濃度抗體的滴度;
② 延長一抗和二抗的孵育時間。由于細胞染色時抗原吸附在固相載體上,抗原抗體結(jié)合時間較在溶液中長。孵育時間可因?qū)嶒炘O(shè)計作適當調(diào)整,但少于20min抗體和抗原幾乎不能有效結(jié)合。在以上兩點中,應(yīng)摸索出一個條件以產(chǎn)生有效信號且保持良好的背景。這就需要反復(fù)試驗,因為每組抗體和抗原的情況會有所不同;
③ 改變檢測方法,用共聚焦顯微鏡觀察,可提高敏感性。
細胞株Col    I 型膠原細胞檢測試劑盒    48 tests/48 well plate
Fibro    纖維母細胞粘附檢測試劑盒    48 tests/48 well plate
MTT    MTT細胞活力和增殖檢測試劑盒    1000 tests/96 well plate
WST    WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒    1000 tests/96 well plate
CSA    細胞衰老檢測試劑盒    50 tests/53 mm plate
GalC    β-半乳糖苷酶比色檢測試劑盒    50 tests/53 mm plate
LDH    LDH細胞毒性檢測試劑盒    500 tests/96 well plate
TUNEL    TUNEL色標法細胞凋亡檢測試劑盒    50 tests/96 well plate
NO    一氧化氮色標法檢測試劑盒    250 tests/96 well plate
pNPP    硝基苯磷酸鈉(pNPP)磷酸酶檢測試劑盒    500 tests/96 well plate
MGmP    孔雀綠磷酸鹽檢測試劑盒    2500 tests/96 well plate
CCA    比色法鈣分析試劑盒    250 tests/96 well plate
CSK    活/死細胞染色試劑盒    1000 tests/96 well plate
GAPDH    比色法GAPDH分析試劑盒    1000 tests/96 well plate
IVTFA    體外管腔形成分析試劑盒    50 tests/96 well plate
TACA    總抗氧化能力檢測試劑盒     100tests
C3DGK    膠原I-3D凝膠試劑盒    100mg
CCCSCK        
SOD    超氧化物歧化酶分析試劑盒    100tests
MYCO    支原體PCR檢測試劑盒    100tests
CAT    過氧化氫酶活性分析試劑盒    100tests
CAS    細胞凋亡蛋白酶-3分析試劑盒    100tests
GPX    *過氧化物酶分析試劑盒    100tests
EndoFectagen® 內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        250 Transfections
FibroFectagen® 成纖維細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        200 Transfections
EpiFectagen® 上皮細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        100 Transfections
MesenFectagen® 間充質(zhì)干細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        250 Transfections
AstroFectagen®星形細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        250 Transfections
KeratoFectagen® 角質(zhì)細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        200 Transfections
SMCFectagen® 平滑肌細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        250 Transfections
NeuroFectagen® 神經(jīng)細胞轉(zhuǎn)染試劑盒        200 Transfections細胞株

 

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