【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱  犬腎細胞；MDCK/IgR培養
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性    
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  
傳代情況  
凍存條件   基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法（-）
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

復蘇操作要點： 
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人GDP解離抑制因2(GdI2)免疫試劑盒    Human GdI2 ELISA kit
人GAD/IA2自身抗體免疫試劑盒    Human GAD/IA2 combined autoantibody ELISA kit
人G1/S特異性細胞周期蛋白E1(CCNE1)免疫試劑盒    Human CCNE1 ELISA kit
人F-肌動蛋白(F-actin)免疫試劑盒    Human F-actin ELISA Kit
人FOS 樣抗原2(FOSL2)免疫試劑盒    Human FOSL2 ELISA Kit
人FMS樣*激酶3配體(Flt-3L)免疫試劑盒    Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit
人FMS樣*激酶3(Flt3)免疫試劑盒    Human FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 ELISA Kit
人Fc受體樣蛋白3(FCRL3)免疫試劑盒    Human FCRL3 ELISA kit
人FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒    Human Protein FAM172A(FAM172A) ELISA kit
人E選擇素(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒    Human E-Selectin ELISA kit
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)免疫試劑盒    Human E-Cad ELISA Kit*基硅烷基三氟磺酸酯    Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate    27607-77-8
異氰酸*基硅酯    TRIMETHYLSILYL ISOCYANATE    1118-02-1
*基乙醛    Trimethylacetaldehyde    630-19-3
三聚甲醛    s-Trioxane    110-88-3
1,2,3-三氯丙烷    1,2,3-Trichloropropane;Glycerol trichlorohydrin    96-18-4
三氯化鈦溶液    Titanous chloride    7705/7/9
三氯    Benzotrichloride    1998/7/7
三十七烷    N-HEPTATRIACONTANE    7194-84-5
亞甲基藍    Methylene Blue trihydrate    7220-79-3
四甘醇    Bis[2-(2-hydroxyethoxy)ethyl] ether    112-60-7
三糖鐵瓊脂培養基（TSI）    NA    
甲基三辛基氯化銨;三辛基甲基氯化銨    MethyltrioctylaMMoniuM chloride    5137-55-3