犬腎細(xì)胞系/野生型；MDCK/wild特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實(shí)驗服務(wù)。

細(xì)胞名稱  犬腎細(xì)胞系/野生型；MDCK/wild特性
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞系源自一只雌性英國可卡犬的腎臟組織，由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。該細(xì)胞為角蛋白陽性細(xì)胞。 
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C7
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR   STR鑒定
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
人P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒    Human myelin protein zero antibody IgG ELISA Kit
人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)免疫試劑盒    Human anti-OJ-antibody，OJ/IleRS ELISA Kit
人N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)免疫試劑盒    Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)免疫試劑盒    Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
人N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)免疫試劑盒    Human N-methyl-D-aspartic Acid Receptor,NMDAR ELISA Kit
人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)免疫試劑盒    Human N-Cad ELISA kit
人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)免疫試劑盒    Human N-MID-OT ELISA Kit
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)免疫試劑盒    Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA KIT乳酸脫氫酶(+4℃)    L-Lactic dehydrogenase    9001-60-9
乳糖一水    Lactose Monohydrate    5989-81-1
乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基    NA    
乳糖膽鹽培養(yǎng)基    Lactose Bile Medium    
乳糖蛋白胨培養(yǎng)基    Lactose medium    
乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基    Lactose Ferment Broth    
乳糖肉湯    LACTOSE BROTH FOR MICROBIOLOGY*    
軟骨素酶 (-20℃)    CHONDROITINASE ABC    9024-13-9
噻吩-2.5-二羧酸97％    2,5-Thiophenedicarboxylic acid    4282-31-9
噻吩-2-磺酰氯    2-Thiophenesulfonyl chloride    16629-19-9
噻吩-2-甲醛    ;    1998/3/3
噻唑藍(lán)    Thiazolyl Blue    298-93-1