細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮分離自尾動(dòng)脈組織；尾動(dòng)脈是鼠尾的主要血管，尾部主要大血管分布表淺，尾側(cè)靜脈適于注射給藥，尾正中動(dòng)脈適于動(dòng)脈采血、練習(xí)顯微外科血管吻合技術(shù)等，實(shí)際應(yīng)用相當(dāng)普遍。許多動(dòng)物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富，供血來(lái)源于薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈兩個(gè)動(dòng)脈，形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結(jié)合的特點(diǎn)，尾部淺層 3 套縱向動(dòng)靜脈系統(tǒng)，鼠尾背側(cè)為不規(guī)則動(dòng)靜脈鏈狀結(jié)構(gòu)，深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通，且呈動(dòng)靜脈血管徑不匹配的特點(diǎn)。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈。其在尾部依尾橫動(dòng)脈形成溝通。尾橫動(dòng)脈呈尾椎節(jié)段性分布，直接溝通尾正中動(dòng)脈、尾深動(dòng)脈和皮支。在尾部被橫斷后，可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動(dòng)靜脈回流通路; 鼠尾存在動(dòng)靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側(cè)靜脈明顯大于伴隨的動(dòng)脈，而正中動(dòng)脈明顯大于伴隨的靜脈，形成供血主要來(lái)自腹面的尾正中動(dòng)，回血主要依靠?jī)蓚?cè)的尾側(cè)靜脈，符合腹面動(dòng)脈保護(hù)的安全性，同時(shí)利于血管散熱，尾橫動(dòng)脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻(xiàn)[王蕾，葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結(jié)構(gòu)與鼠尾的生理功能探討]。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠抗酸性0酸酶(ACP5)試劑盒 ，英文名： ACP5 ELISA Kit

Monkey glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒

RaeninELISAKit 大鼠腎素(Renin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFree-T3(MouseFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit小鼠游離三甲狀腺原

細(xì)胞活化10(FACTORXa)活性比色法定量試劑盒20次

Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISAKit大鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子 (Eotaxin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) Biosource

Human Eotaxin-2/MPIF-2/CCL24   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

Human Eotaxin-3/CCL26   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

促紅細(xì)胞生成素 (EPO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   德國(guó) DRG

巴胺受體D2抗體

豚鼠血清(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat signal ansduction molecule 1 (Smad1) ELISA Kit 大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)試劑盒

Humanendomorphin-2,EM-2ELISAKit 人內(nèi)肽-2(EM-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCryoglobulin,CG試劑盒人冷球蛋白(CG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織D-乳酸比色法定量試劑盒20次

humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKit人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)試劑盒規(guī)格：96T/48T

磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體

S100B重組小鼠 S100B / S100beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)重組蛋白 Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)

DDR2重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein

IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

IL17RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)

IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

TCN2重組小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 Protein

IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

B3GNT2重組人 B3GNT2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein