細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
大鼠口腔粘膜成纖維分離自口腔粘膜組織；口腔（oral cavity）是消化道的起始部分。前借口裂與外界相通，后經咽峽與咽相續。口腔內有牙、舌等器官。口腔的前壁為唇、側壁為頰、頂為腭、口腔底為黏膜和肌等結構。口腔借上、下牙弓分為前外側部的口腔前庭（oral vestibule）和后內側部的固有口腔（oral cavity proper）；當上、下頜牙咬合時，口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠口腔粘膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠口腔粘膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 口腔黏膜組織 | 產品貨號 | YS-01X7668 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品：
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒
Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒
Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細胞外信號調節激酶(ERK)試劑盒 進口分裝
HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒
木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
酸性木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
堿性木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
β-木糖苷酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
CD71單克隆抗體
豬雌激素(E)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 人巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒
Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit 豬促胃液素受體(GsaR)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALP-B(MouseBone-specificAlkphaseB)ELISAKit小鼠骨特異性堿性0酸酶B
血液0酸二酯酶5(PDE5)活性酶連續循環定0比色法定量試劑盒20次
Mouseα-Glucosidase,a-GluELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒
甘油激酶抗體
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標簽
NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽)
大鼠口腔粘膜成纖維細胞Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標簽
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽)
TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
