熒光素標(biāo)記硫酯包含蛋白-1抗體IgG動物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級小鼠。熒光素標(biāo)記硫酯包含蛋白-1抗體IgG A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,公司產(chǎn)品詳情請參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊:
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1,Eotaxin 1/CCL11ELISA試劑盒 Rat Eotaxin 1 ELISA試劑盒
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子,ECFELISA試劑盒 Rat eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA試劑盒
大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子,EG-VEGFELISA試劑盒 Rat Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA試劑盒
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶,1,3-βD-GluELISA試劑盒 Rat 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA試劑盒
大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體,sEPCR酶聯(lián)免疫分析大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體,sEPCR酶聯(lián)免疫分析體,sEPCRELISA試劑盒 Rat soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA試劑盒
大鼠CD30分子,CD30ELISA試劑盒 Rat Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA試劑盒
大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白,E-CadELISA試劑盒 Rat Epithelial-Cadherin,E-Cad ELISA試劑盒
大鼠β細(xì)胞素,BTCELISA試劑盒 Rat beta cellulin,BTC ELISA試劑盒
大鼠血管生成素2,ANG-2ELISA試劑盒 Rat Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA試劑盒
大鼠血管生成素1,ANG-1ELISA試劑盒 Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA試劑盒
大鼠血管生長素,ANGELISA試劑盒 Rat Angiogenin,ANG ELISA試劑盒
大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子,KAF/雙調(diào)蛋白,ARELISA試劑盒 Rat keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA試劑盒
(2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長,單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.
成立于2012年,經(jīng)過數(shù)年的努力已迅速成為集科研和為一體的專業(yè)化生物工程公司。特別是ELISA,代測,技術(shù)服務(wù)這一產(chǎn)品已使上海撫生成為中國公司。
公司產(chǎn)品涵蓋ELISA、細(xì)胞培養(yǎng),各種生化試劑、各種酶類、分子生物學(xué)試劑盒、培養(yǎng)基、自產(chǎn)實(shí)驗(yàn)室耗材、小型儀器等。此外、上海撫生還代理了美國藥典標(biāo)準(zhǔn)品,中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類公司的產(chǎn)品。
上海撫生將進(jìn)一步加強(qiáng)人才經(jīng)營、產(chǎn)品經(jīng)營,不斷提升企業(yè)的核心竟?fàn)幜Γ瑢?shí)現(xiàn)具有產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)的化的公司,服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接世界經(jīng)濟(jì)一體化所帶來的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。