ELISA試劑盒顯色反應(yīng)來(lái)完成測(cè)定

2014年08月06日 10:35上海撫生實(shí)業(yè)有限公司點(diǎn)擊量：340

因此，一個(gè)ELISA試劑盒測(cè)定試劑，其有機(jī)組成部分包括：（1）包被的抗原或抗體的固相支持物，即聚苯乙烯塑料微孔或試管；（2）酶標(biāo)記的抗體或抗原和（3）酶的反應(yīng)底物等。抗原或抗體的固相化，并不影響其免疫結(jié)合活性，酶標(biāo)記的抗體或抗原亦是如此，ELISA試劑盒并且標(biāo)記酶的活性不因標(biāo)記過(guò)程而喪失。整個(gè)測(cè)定中，抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相支持物上進(jìn)行，反應(yīng)結(jié)果的判斷，以酶與其底物作用后的顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光反應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)，顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光的強(qiáng)度，與臨床標(biāo)本中待測(cè)物的濃度成正比或反比關(guān)系。

目前國(guó)內(nèi)的ELISA試劑盒均以酶的通常，固相免疫測(cè)定如ELISA試劑盒中，抗原與抗體結(jié)合達(dá)到平衡所需要的時(shí)間，較液相免疫測(cè)定要長(zhǎng)，并隨液體所占體積與界面抗體或抗原受體所占體積比的增加而增加。當(dāng)在微孔板孔內(nèi)進(jìn)行免疫測(cè)定時(shí)，界面反應(yīng)動(dòng)力學(xué)顯示其對(duì)擴(kuò)散作用有很強(qiáng)的依賴性，擴(kuò)散性越強(qiáng)，則反應(yīng)所需時(shí)間越短，結(jié)合越充分。

這一點(diǎn)可通過(guò)旋轉(zhuǎn)振蕩來(lái)達(dá)到，微孔的旋轉(zhuǎn)振蕩可促使液體進(jìn)入到可與抗體或抗原包被的界面接觸的較小的區(qū)域內(nèi)。也可在微孔中放一個(gè)惰性的塞子以使反應(yīng)液體成為一個(gè)小體積，或使用一個(gè)具有大表面的多孔的基質(zhì)如硝酸纖維素，或使用微顆粒來(lái)做到這一點(diǎn)。微顆粒小于1μm時(shí)，在測(cè)定時(shí)即成膠體懸液，而當(dāng)顆?；蛑檩^大時(shí)，則會(huì)在沒(méi)有振蕩時(shí)，由于重力的作用而分開。所有上述方法均是通過(guò)減少液體所占體積與界面抗體或抗原受體所占體積比，ELISA試劑盒從而減少固相免疫測(cè)定的擴(kuò)散依賴性。通常所提到的抗原與抗體的相互作用，一般指的是在液相狀態(tài)下，而在固相狀態(tài)下，抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)有其相應(yīng)的特點(diǎn)，主要表現(xiàn)在以下四個(gè)方面。

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