細(xì)胞簡(jiǎn)介：
雞小腸黏膜上皮分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過(guò)闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后，基本上完成了消化過(guò)程，同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動(dòng)的動(dòng)力，促使食物向下運(yùn)動(dòng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞小腸黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來(lái)源 | 小腸組織 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7039 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠雌一醇(E1)試劑盒 ，英文名： E1 ELISA Kit
Mouse 25 hydroxyvitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA Kit 小鼠25羥基3(25(OH)試劑盒D3/25 HVD3)試劑盒
ELISA 小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(mouse CTGF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLHELISAKit大鼠促黃體激素
通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitADM腎上腺髓質(zhì)素
鐵測(cè)試盒 Iron test case
錳測(cè)試盒 Manganese test case
鎳測(cè)試盒 Nickel test case
鹽快速測(cè)試盒 Niate rapid test case
GRWD1蛋白抗體
小鼠15-脂氧合酶(15-LOX)試劑盒 96T/48T
Human Pro gasin releasing peptide (ProGRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒
HumanPeosidineELISAKit 人戊糖素(Peosidine)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCoxsackievirusIgM,CoxV-IgM試劑盒人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
富含脯突觸相關(guān)蛋白SHANK1抗體
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽) Protein
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
雞小腸黏膜上皮細(xì)胞Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽) Protein
