細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠胎盤絨毛膜分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。絨毛膜是由滋養層和胚外中胚層的壁層構成。胚泡植入子宮內膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細胞滋養層為中軸,外裹合體滋養層,稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內形成血管網和結締組織,并與胚體內的血管相通時,次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養層細胞形成細胞滋養層殼。隨著胚胎發育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯合消化法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜經hCG免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 胎盤 | 產品貨號 | YS-01X8530 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形、多角形
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠胎盤絨毛膜體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠熱休克蛋白β6(HSPβ6)試劑盒 ,英文名: HSPβ6 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)試劑盒
RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGTE-AGE(HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts)ELISAKit人腎小球組織糖基化終末產物
細胞超長鏈脂酰脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AILR4ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)試劑盒規格:96T/48T
小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit ELISA
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISAKit ELISA
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISAKit ELISA
小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISAKit ELISA
泛素特異性蛋白酶OTB1抗體
APC標記的單羧酸轉運蛋白2抗體
CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein
BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)
ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein
CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白
COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標簽)
BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)
CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白
CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein
COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標簽)
ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein
小鼠胎盤絨毛膜細胞小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒
HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)pcr檢測試劑盒分裝
DuckIerferonγ,IFN-γ試劑盒鴨γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞組蛋白熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousediamineoxidase,DAOELISAKit小鼠氧化酶(DAO)試劑盒規格:96T/48T
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取