細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠棕色脂肪分離自棕色脂肪組織;動物體內存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負責儲存多余熱量;棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪,將后者轉化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點是組織中有豐富的毛細血管,脂肪細胞內散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細胞中央,這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,新生兒及冬眠動物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失。終,動物體內只殘存少量棕色脂肪細胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色(棕色)脂肪細胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數量達到,此后數量一般不再增加。細胞內含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質泡,富含光面內質網。此外,還有一種褐色脂肪細胞,在動物體內主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團縮的褐色脂肪,作用是將脂質分解產熱,調節體內脂質比例。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪經油紅O染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 脂肪組織 | 產品貨號 | YS-01X7631 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠白介素18(IL-18)試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit
Mouse alanine aminoansferase (ALT) ELISA Kit 小鼠氨基轉移酶(ALT)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-23(mouse IL-23) 進口分裝
CLIAKitforIL-2sRBetaELISAKit大鼠白介素2可溶性受體β鏈
通用型雞新城疫(NewcastleDiseaseVirus;NDV)試劑盒20次
ELISAKitFA大鼠
兔白介素-1a(rabbit IL-1a) 作用: ELISA
兔白介素-1β(rabbit IL-1β) 作用: ELISA
兔白介素-1RA(rabbit IL-1ra) 作用: ELISA
兔白介素-2(rabbit IL-2) 作用: ELISA
GRXCR1蛋白抗體
小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human pepsin (Pepsin) ELISA Kit 人(Pepsin)試劑盒
Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit 人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancomplexedprostatespecificaigen,cPSA試劑盒人復合前列腺特異性抗原(CPSA)試劑盒規格:96T/48T
組織CDK4/CYCLIND激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISAKit人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)試劑盒規格:96T/48T
上皮盤狀結構域受體1抗體
彩色預染蛋白Mark(10帶) 200ul
Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原 0.5mgTrop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原
INSR重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (long isoform, His 標簽) Protein
ICAM5 Protein Human 重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 標簽)
EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠棕色脂肪細胞Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原 0.5mgTrop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原
ICAM5 Protein Human 重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 標簽)
彩色預染蛋白Mark(10帶) 200ul
EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標簽)
INSR重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (long isoform, His 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取