細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠小腸隱窩上皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環行皺襞從幽門附近開始出現,在十二指腸末段和空腸頭段極發達,向下逐漸減少和變矮,至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細小的腸絨毛,是由上皮和固有層向腸腔突起而成,形狀不一,以十二指腸和空腸頭段發達。絨毛于十二指腸呈葉狀,于空腸呈指狀,于回腸則細而短。環行皺襞和絨毛使小腸表面積擴大20-30倍,絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺,又稱腸隱窩,故小腸腺與絨毛的上皮是連續的,小腸腺直接開口于腸腔。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 小腸組織 | 產品貨號 | YS-01X7150 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠顆粒酶K(GZMK)試劑盒 ,英文名: GZMK ELISA Kit
Mouse apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒
RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 大鼠(EPI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFSHELISAKit魚促卵泡素
細胞環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量試劑盒20次
RatPlateletFactor4,PF-4ELISAKit大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒規格:96T/48T
兔胰島素樣生長因子1(rabbit IGF-1) 作用: ELISA
兔損傷分子-1(rabbit Kim-1) 作用: ELISA
兔瘦素(rabbit Leptin) 作用: ELISA
兔巨噬細胞癥蛋白-5(rabbit MIP-5) 作用: ELISA
β1,3半乳糖轉移酶3抗體
小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat leptin (LEP) ELISA Kit 大鼠瘦素(LEP)試劑盒
HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit 人雄激素結合蛋白(ABP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCholicacid,CA試劑盒人膽酸(CA)試劑盒規格:96T/48T
總L-高半胱(Hcy)定量試劑盒50次
Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISAKit人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)試劑盒規格:96T/48T
磷酸化星形膠質細胞升高基因1抗體
HA重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha 0.5mgRXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原
CST7重組人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 Protein
GSTM5 Protein Human 重組人 GSTM5 蛋白
IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠小腸隱窩上皮細胞RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha 0.5mgRXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原
GSTM5 Protein Human 重組人 GSTM5 蛋白
HA重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)
CST7重組人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取