| 商品屬性:
組織來源 | 骨髓 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
產品貨號 | YS-01X7891 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 圓形,樹突狀 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
| 細胞介紹:
小鼠骨髓樹突狀分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態不規則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成,多數呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節;未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答,不能激活T細胞的信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。
| 方法簡介:
實驗室分離的小鼠骨髓成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質量檢測:
實驗室分離的小鼠骨髓樹突狀(成熟DC細胞)經CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
| 培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:半貼壁半懸浮
細胞形態:圓形,樹突狀
傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠骨髓樹突狀(成熟DC細胞)體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
| 細胞培養操作:
1)復蘇細胞:將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項:
1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養條件*。若由于培養條件不*而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產品
大鼠肌原纖蛋白1(FBN1)試劑盒 ,英文名: FBN1 ELISA Kit
Mouse histone deacetylase (HD) ELISA Kit 小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)試劑盒
RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFXELISAKit大鼠Ⅹ
細胞精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒規格:96T/48T
小鼠α半乳糖基抗原試劑盒 小鼠α半乳糖基抗原試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠α半乳糖基抗原試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠α半乳糖基抗原試劑盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒 小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒、小鼠αN已酰基葡糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
CD31單克隆抗體(工作液)
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒
humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列腺素E1(PGE1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-parotidductaibody試劑盒人抗腮腺管抗體(ai-parotidductAb)試劑盒規格:96T/48T
植物細胞壁束縛酸性蔗糖轉化酶(acidinvease)活性比色法定量試劑盒(胞壁)20次
Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激酶1(Tie1)試劑盒規格:96T/48T
神經叢蛋白B1抗體
EPHA7重組小鼠 EphA7 / EHK-3 蛋白 Protein
Annexin V 膜粘連蛋白-5(抗原 0.5mgAnnexin V 膜粘連蛋白-5(抗原)
CLPS重組人 CLPS / Colipase 蛋白 Protein
FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白
REG1A Protein Rat 重組大鼠 REG1A / PSPS 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠骨髓樹突狀細胞(成熟DC細胞)Annexin V 膜粘連蛋白-5(抗原 0.5mgAnnexin V 膜粘連蛋白-5(抗原)
FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白
EPHA7重組小鼠 EphA7 / EHK-3 蛋白 Protein
REG1A Protein Rat 重組大鼠 REG1A / PSPS 蛋白 (Fc 標簽)
CLPS重組人 CLPS / Colipase 蛋白 Protein