兔牙齦上皮細(xì)胞

| 商品屬性：

| 細(xì)胞介紹：

兔牙齦上皮分離自牙齦組織；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱為齦緣，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦，通稱牙床；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色，內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦上皮長期被認(rèn)為是抵御口腔中持續(xù)存在的細(xì)菌的被動(dòng)免疫屏障，隨著對(duì)牙周致病菌的不斷認(rèn)識(shí)，發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障，上皮細(xì)胞還可以分泌抗菌多肽，參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的第一道屏障，在抵御牙周炎細(xì)菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用，建立正常牙齦上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系，將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/span>

| 方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔牙齦上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠鈣非依賴型0脂酶A2(iPLA2)試劑盒 ，英文名： iPLA2 ELISA Kit

Pig two amine oxidase (DAO) ELISA Kit 豬氧化酶(DAO)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMCAb(Humanmelanocyteaibody)ELISAKit人黑色素細(xì)胞抗體

體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitβ-EP馬β內(nèi)啡肽

小鼠血管性血友病因子   英文名稱：   von Willebrand Factor   英文縮寫：   VWF

蠶多巴胺   英文名稱：   Bombyx Dopamine   英文縮寫：   DPA

   英文名稱：   Total Niic Oxide   英文縮寫：   NO

骨橋素/骨橋蛋白   英文名稱：   Osteopoin   英文縮寫：   OPN

FAM205A蛋白抗體

LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體

BST2重組小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白 Recombinant Galectin 8 (GAL8)

IL22重組人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋白 Protein

CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白

TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

AM (Adrenomedullin; ADM 0.1mgAM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質(zhì)素(多肽抗原)

CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白

SLAMF6重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein

TLR2 Protein Rat 重組大鼠 TLR2 蛋白

ENPP5重組人 ENPP5 蛋白 Protein

兔牙齦上皮細(xì)胞小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat high mobility group protein 1 (HMG-1) ELISA Kit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒

Humanadenosinedeaminase,ADAELISAKit 人腺苷脫氨酶(ADA)pcr檢測試劑盒分裝

Chickencarbonicanhydrase,CA試劑盒雞酶(CA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHexokinase,HKELISAKit小鼠己糖激酶(HK)試劑盒規(guī)格：96T/48T

| 注意事項(xiàng)：

1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺(tái)盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用