細(xì)胞簡介：
兔肌源性干分離自肌肉組織；肌源性干細(xì)胞（MDSCs）屬于成體多能干細(xì)胞，具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激，MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類型；作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞，已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點(diǎn)；近年來，肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視。需注意的是，肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中，只是成熟組織的很少部分細(xì)胞；平時(shí)處于靜止?fàn)顟B(tài)，在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時(shí)才會(huì)激活；并且隨著年齡的增加，所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少，而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進(jìn)行。肌源性干細(xì)胞的體外擴(kuò)增對細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要。對肌源性干細(xì)胞的擴(kuò)增研究發(fā)現(xiàn)，EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂周期，從而刺激細(xì)胞增生。更重要的是，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴(kuò)增可以通過自我更新不刺激細(xì)胞分化，從而保持干細(xì)胞表型。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌源性干采用膠原酶--聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法，后通過肌源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌源性干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 骨骼肌組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7080 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白介素12(IL-12/P40)試劑盒 ，英文名： IL-12/P40 ELISA Kit
Mouse pyruvate dehydrogenase E1 (PDH E1) ELISA Kit 小鼠酸脫氫酶E1(PDH E1)試劑盒
ELISA 小鼠白三烯B4(mouse LTB4) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-28(humanIerleukin28)ELISAKit人白介素28
通用型酵母樣品細(xì)胞周期G1/S和G2/M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
PDGFsR-α大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α
小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠apelin12(AP12)ELISAKit ELISA. 96T/48T
HERC6 E3泛素蛋白連接酶抗體
小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human smooth muscle myosin (SMM) ELISA Kit 人平滑肌肌球蛋白(SMM)試劑盒
Humanheafattyacidbindingprotein,h-FABPELISAKit 人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒規(guī)格：96T/48T
正常男性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體
HMGB1重組小鼠 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
白介素1受體Ⅱ(IL1R2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Receptor Type II (IL1R2)
PLEK重組人 Pleckstrin / PLEK / p47 蛋白 Protein
CSTA Protein Human 重組人 Cystatin A / CSTA 蛋白
CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
兔肌源性干細(xì)胞白介素1受體Ⅱ(IL1R2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Receptor Type II (IL1R2)
CSTA Protein Human 重組人 Cystatin A / CSTA 蛋白
HMGB1重組小鼠 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PLEK重組人 Pleckstrin / PLEK / p47 蛋白 Protein
