細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
兔滑膜成纖維分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構,各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構,同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎(OA)以關節軟骨退行性變為特征,其病理改變累及關節的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體,是維持關節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。
方法簡介:
實驗室分離的兔滑膜成纖維采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔滑膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 滑膜 | 產品貨號 | YS-01X8008 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔滑膜成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠硒蛋白P1(SEPP1)試劑盒 ,英文名: SEPP1 ELISA Kit
Mouse retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 小鼠結合蛋白4(RBP-4)試劑盒
MouseIerleukin23,IL-23ELISAKit 小鼠白介素23(IL-23)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHSP-27ELISAKit大鼠熱休克蛋白27
細胞MET激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-13大鼠白介素13
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)試劑盒 96T/48T
小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒 96T/48T
小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒 96T/48T
小鼠抗(AT)試劑盒 96T/48T
線粒體肌酸激酶CKMT抗體
小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒
HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒 96T/48T 進口分裝
FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP試劑盒魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量試劑盒20次
MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補體片斷3a(C3a)試劑盒規格:96T/48T
G蛋白偶聯受體169抗體
CD55重組小鼠 CD55 / DAF 蛋白 Protein
白介素2受體β(IL2Rβ)重組蛋白 Recombinant Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb)
ERH重組人 ERH / DROER 蛋白 Protein
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
COLEC12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白
兔滑膜成纖維細胞白介素2受體β(IL2Rβ)重組蛋白 Recombinant Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb)
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
CD55重組小鼠 CD55 / DAF 蛋白 Protein
COLEC12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白
ERH重組人 ERH / DROER 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。