產品屬性:
產品名稱:沙門氏菌快速檢測試劑盒48T 貨號:FS-02R6321 規格:48T 分類:恒溫熒光法 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 |
及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔) 2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。 3、 樣品稀釋液:1×20ml。 4、 檢測稀釋液A:1×10ml。 5、 檢測稀釋液B:1×10ml。 |
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
特點優勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
ARFRP1 ADP核糖基化因子相關蛋白1
Argininosuccinate Lyase 琥珀酸裂解酶抗體
Arginyl tRNA synthetase 精氨酰tRNA合成酶抗體
Argonaute 3 真核翻譯起始因子2C3抗體
Argonaute 4 真核翻譯起始因子2C4抗體
ARHGAP15 Rho GTP酶激活蛋白15抗體
ARID1B 抑癌基因結合蛋白ARID1B抗體
ARIH2 E3連接酶蛋白ARIH2抗體
ARFL1 ADP核糖基化樣因子1抗體
ARL4 ADP核糖基化因子樣蛋白4抗體
ARP2 肌動蛋白相關蛋白2/3抗體
ARPC2 肌動蛋白相關蛋白2/3亞型2抗體
ARPC4 肌動蛋白相關蛋白2/3亞型4抗體
ARSI 芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體
ART1 抑制相關蛋白PHEMX抗體
ARVCF 精神分裂癥與犰狳重復基因抗體
ALDH1 乙醛脫氫酶1型抗體
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser80) 磷酸化乙酰羧化酶抗體
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263) 磷酸化乙化酶抗體
輪狀病毒RNA核酸檢測試劑盒 48T 輪狀病毒RNA快速檢測試劑盒48T
沙門氏菌核酸檢測試劑盒 48T 00.1PCR管
沙門氏菌核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR 0.2PCR管
創傷弧菌核酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 創傷弧菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
創傷弧菌核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 創傷弧菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
副溶血性弧菌核酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 副溶血性弧菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
副溶血性弧菌核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 副溶血性弧菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
志賀氏菌核酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 志賀氏菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
志賀氏菌核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 志賀氏菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
腸出血性大腸桿菌O157核酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 腸出血性大腸桿菌O157快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
腸出血性大腸桿菌O157核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 腸出血性大腸桿菌O157快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
單核細胞增生李斯特氏菌核酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 單核細胞增生李斯特氏菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
單核細胞增生李斯特氏菌核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 單核細胞增生李斯特氏菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 測試劑盒48T 0.1PCR管
核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
霍亂弧菌核酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 霍亂弧菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
沙門氏菌快速檢測試劑盒48T霍亂弧菌核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 霍亂弧菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
銅綠假單胞菌核酸檢測試劑盒 48T 0.1PCR管 銅綠假單胞菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
銅綠假單胞菌核酸檢測試劑盒 48T 0.2PCR管 銅綠假單胞菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。