一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2001 |
細(xì)胞名稱：小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞
組織來源：胎盤組織
種屬來源：小鼠
細(xì)胞簡介：小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶組織；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是一種能分化成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的多能干細(xì)胞。其具有強(qiáng)大的增殖能力，且參與構(gòu)成造血微環(huán)境，因此被廣泛應(yīng)用于組織工程，細(xì)胞治療和基因治療。
培養(yǎng)基：MSCM基礎(chǔ)培養(yǎng)基：，F(xiàn)BS，Penicillin，Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
包被條件：-
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
二、使用方法：
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳可傳3-5代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
性葡糖α(GαA)ELISA試劑盒 | 小鼠頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠腦血管周細(xì)胞 | 唾液轉(zhuǎn)移9(SIAT9)ELISA試劑盒 |
小鼠脊髓神經(jīng)元 | 人甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)試劑盒 ELISA |
小鼠心肌細(xì)胞，MCM細(xì)胞 | 唾液轉(zhuǎn)移8E(SIAT8E)ELISA試劑盒 |
小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞 | 唾液轉(zhuǎn)移8D(SIAT8D)ELISA試劑盒 |
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 | 突觸核蛋白γ(γSYN)ELISA試劑盒 |
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B[HEC-1B;HEC1B] | 羧酯3(CES3)ELISA試劑盒 |
小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞 | 唾液轉(zhuǎn)移8(SIAT8)ELISA試劑盒 |
小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞 | 唾液轉(zhuǎn)移7F(SIAT7F)ELISA試劑盒 |
大鼠肝間質(zhì)細(xì)胞 | 硒蛋白S(SELS)ELISA試劑盒 |
人喉癌上皮細(xì)胞；Hep-2 | 唾液轉(zhuǎn)移7D(SIAT7D)ELISA試劑盒 |
小鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞 | 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞唾液轉(zhuǎn)移7C(SIAT7C)ELISA試劑盒 |
人成骨肉瘤細(xì)胞；MG-63 | 唾液轉(zhuǎn)移7B(SIAT7B)ELISA試劑盒 |
小鼠NK細(xì)胞 | 糖磺基轉(zhuǎn)移7(CHST7)ELISA試劑盒 |
小鼠晶狀體上皮細(xì)胞 | 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒 |
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：
公司產(chǎn)品僅用于科研關(guān)于原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)。原代細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)非常重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，掌握好這些注意事項(xiàng)，能讓你的實(shí)驗(yàn)更順利。
首先，無菌操作是關(guān)鍵。一定要保持操作環(huán)境的清潔，避免細(xì)菌或霉菌污染，否則實(shí)驗(yàn)就會(huì)失敗。
其次，選擇適合的培養(yǎng)基和血清也很重要。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基和血清的需求不同，所以要根據(jù)細(xì)胞類型來選擇合適的培養(yǎng)基和血清。
另外，也是細(xì)胞培養(yǎng)中的成分。要新鮮配制，在貯存過程中也要定期補(bǔ)充。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，靜置培養(yǎng)也是非常重要的。細(xì)胞在消化分離后需要一定的時(shí)間來適應(yīng)新環(huán)境，所以在這段時(shí)間內(nèi)要避免頻繁取出培養(yǎng)瓶觀察。
此外，消化時(shí)間也要控制得當(dāng)。通常消化至肉眼可見微小組織顆粒即可，過長的消化時(shí)間會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷加重，影響細(xì)胞培養(yǎng)成活率。
最后，對(duì)于一些特殊類型的細(xì)胞，可能需要添加一些特殊的生長因子來促進(jìn)細(xì)胞生長和增殖。但需要注意的是，這些生長因子的費(fèi)用通常較高。
