PCR擴(kuò)增條帶常見(jiàn)問(wèn)題及原因分析

2025年02月10日 09:46上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司點(diǎn)擊量：102

PCR擴(kuò)增條帶分析‌主要包括對(duì)不同條帶的識(shí)別、原因分析及相應(yīng)的解決方法。

PCR擴(kuò)增后，電泳條帶通常包括以下幾種類型：‌

‌引物帶‌：引物濃度過(guò)高或擴(kuò)增效率不高時(shí)會(huì)出現(xiàn)引物帶，通常表現(xiàn)為發(fā)散狀。如果目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當(dāng)降低引物量。

‌引物二聚體帶‌：引物二聚體比引物跑得慢一點(diǎn)，條帶清晰。如果擴(kuò)增產(chǎn)物小于100bp時(shí)，產(chǎn)物與引物二聚體不好分別，建議采用DNA聚丙烯酰胺電泳。

‌目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶‌：大小與設(shè)計(jì)大小相同，條帶清晰。
‌
非特異擴(kuò)增產(chǎn)物帶‌：大小與設(shè)計(jì)大小不相同，條帶清晰。一般通過(guò)提高復(fù)性溫度來(lái)減少或消除。

‌模板DNA帶‌：模板濃度過(guò)高時(shí)可能出現(xiàn)。如果是基因組DNA為模板，條帶可能會(huì)很亂且較大。

常見(jiàn)問(wèn)題及原因分析
‌
無(wú)擴(kuò)增條帶‌：可能原因包括模板中含有雜蛋白、Taq酶抑制劑、模板變性不徹di底等。解決方法包括配制有效而穩(wěn)定的消化處理液，固定提取程序，檢查加樣過(guò)程等。

‌特異性擴(kuò)增條帶‌：可能原因是引物特異性不高或模板中存在雜質(zhì)。解決方法包括重新設(shè)計(jì)引物，優(yōu)化模板處理步驟。
‌
片狀涂抹帶‌：可能原因是PCR反應(yīng)過(guò)度或引物濃度過(guò)高。解決方法包括減少循環(huán)次數(shù)或降低引物濃度。

‌多條帶‌：可能原因是引物用量偏大、循環(huán)次數(shù)過(guò)多、酶的用量偏高或質(zhì)量不好等。解決方法包括調(diào)換引物或降低引物的使用量，減少循環(huán)次數(shù)，更換或調(diào)換酶。

實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)

‌模板制備‌：確保模板DNA的純度和濃度，避免雜蛋白和抑制劑的存在。

‌引物設(shè)計(jì)‌：選擇特異性高的區(qū)段設(shè)計(jì)引物，避免引物長(zhǎng)度不夠或形成二聚體。

‌酶的質(zhì)量‌：使用高質(zhì)量的酶，避免酶失活，必要時(shí)更換新酶。

‌PCR條件‌：優(yōu)化變性、退火和延伸溫度和時(shí)間，確保PCR循環(huán)條件的合理性。

‌防止污染‌：操作過(guò)程中注意防止基因組或小片段核酸的污染，確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的潔凈。

通過(guò)以上分析和解決方法，可以有效解決PCR擴(kuò)增過(guò)程中出現(xiàn)的各種條帶問(wèn)題，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

上一篇：車載式氣象觀測(cè)站：提供的實(shí)時(shí)氣象數(shù)據(jù)，可以幫助救援人員了解現(xiàn)場(chǎng)氣象

下一篇：森林火險(xiǎn)預(yù)警氣象站：智能識(shí)別技術(shù)，提高火險(xiǎn)預(yù)警的準(zhǔn)確性和及時(shí)性

版權(quán)與免責(zé)聲明： 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：智慧城市網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-智慧城市網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：智慧城市網(wǎng)cchxqp518.com”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。

本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來(lái)源（非智慧城市網(wǎng)cchxqp518.com）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)或和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。

免費(fèi)注冊(cè)后，你可以
了解安防行業(yè)更多資訊查看安防行業(yè)供求信息凸顯安防行業(yè)自身價(jià)值馬上注冊(cè)會(huì)員
想快速被買家找到嗎
只需要發(fā)布一條商機(jī)，被買家找到的機(jī)會(huì)高達(dá)90%！還等什么？馬上發(fā)布信息

編輯精選

云計(jì)算與云網(wǎng)絡(luò)：有什么區(qū)別？

在數(shù)字化轉(zhuǎn)型的浪潮中，云計(jì)算與云網(wǎng)絡(luò)已成為現(xiàn)代企業(yè)IT架構(gòu)的核心技術(shù)。
聚焦民生痛點(diǎn)，破解停車?yán)Ь常囄灰龑?dǎo)系統(tǒng)

通過(guò)采取一種“小切口”的精準(zhǔn)監(jiān)督策略，他們致力于深入細(xì)致地查找并解決這些問(wèn)題
陜西銅川人臉識(shí)別門禁廠家、人行通道擺閘/

作為城市基礎(chǔ)設(shè)施的重要一環(huán)，人臉識(shí)別門禁系統(tǒng)與人行通道閘機(jī)（擺閘、翼閘、三輥
黑龍江大興安嶺反向?qū)ぼ囅到y(tǒng)、視頻找車解決

融合反向?qū)ぼ囅到y(tǒng)、視頻找車解決方案及車位導(dǎo)航找車機(jī)的智慧停車技術(shù)，正成為當(dāng)?shù)?/span>
云南曲靖人臉識(shí)別門禁廠家、人行通道擺閘/

本文將從技術(shù)特性、場(chǎng)景適配、選型邏輯等維度，解讀當(dāng)前主流解決方案的落地價(jià)值。
智慧停車不能有了便利忘了安全，筑牢數(shù)據(jù)安

智慧停車系統(tǒng)的普及極大便利了出行，提高了停車場(chǎng)管理效率。
貴州遵義人臉識(shí)別門禁廠家、人行通道擺閘/

融合人臉識(shí)別技術(shù)的擺閘、翼閘、三輥閘系統(tǒng)逐漸成為本地智慧化升級(jí)的重要方向。
轉(zhuǎn)基因檢測(cè)儀—有效監(jiān)控市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品

轉(zhuǎn)基因檢測(cè)儀是一種先進(jìn)的科學(xué)儀器，主要用于快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)樣本中是否含有轉(zhuǎn)基

本站精選

交通領(lǐng)域動(dòng)態(tài)速覽｜我國(guó)將加快車聯(lián)網(wǎng)等融合

智能交通對(duì)于提升城市交通效率、改善居民出行體驗(yàn)、保障交通安全以及推動(dòng)城市可持
地方工信快報(bào)來(lái)了｜河北、四川、福建......

作為與智慧城市行業(yè)息息相關(guān)的行業(yè)，工信領(lǐng)域近期有哪些新動(dòng)向，一起來(lái)看看！
一文回顧近期安防要聞（3月1日-3月8日）

隨著技術(shù)進(jìn)步，安防在城市發(fā)展中的作用將更加突出。近期有哪些大事發(fā)生？一起來(lái)看
智慧城市一周熱點(diǎn)回顧｜工信部印發(fā)《加快推

世界每時(shí)每刻都在發(fā)生變化，2025年3月3日-3月9日，智慧城市領(lǐng)域有哪些動(dòng)態(tài)變化發(fā)
地方工信快報(bào)來(lái)了｜深圳、重慶、武漢......

作為與智慧城市行業(yè)息息相關(guān)的行業(yè)，工信領(lǐng)域近期有哪些新動(dòng)向，一起來(lái)看看！
交通領(lǐng)域動(dòng)態(tài)速覽｜加強(qiáng)智能網(wǎng)聯(lián)準(zhǔn)入和召回

智能交通對(duì)于提升城市交通效率、改善居民出行體驗(yàn)、保障交通安全以及推動(dòng)城市可持
智慧城市一周熱點(diǎn)回顧｜國(guó)務(wù)院國(guó)資委部署深

2025年2月24日-3月2日，智慧城市領(lǐng)域有哪些動(dòng)態(tài)變化發(fā)生？一起來(lái)看看！
一文回顧近期安防要聞（2月21日-2月27日）

安防不僅是城市安全的基石，也是推動(dòng)城市經(jīng)濟(jì)、社會(huì)發(fā)展和提升居民生活質(zhì)量的關(guān)鍵