技術(shù)資料| 改良吉姆薩染色液(20X)

　　改良吉姆薩染色液(Modified Giemsa Staining Solution)，也稱瑞氏-吉姆薩染色液(Wright-Giemsa Staining Solution)，是用于細(xì)胞、血液、骨髓涂片或組織切片等樣品染色的染色液。根據(jù)細(xì)胞成分的化學(xué)性質(zhì)，改良吉姆薩染色液可將細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色或藍(lán)色，將細(xì)胞核染成紫紅色或藍(lán)紫色。在光學(xué)顯微鏡下呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞及染色體圖像，便于對細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察及異常變化的識別。

　　吉姆薩染色(Giemsa stain)，又稱姬姆薩染色，是以德國化學(xué)家、細(xì)菌學(xué)家Gustav Giemsa的名字來命名的，最初是用于瘧疾病人體內(nèi)寄生蟲的診斷，后由于對染色質(zhì)和細(xì)胞核膜的高質(zhì)量染色而用于組織病理學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)。吉姆薩染色對細(xì)胞質(zhì)著色較好，結(jié)構(gòu)顯示清晰，但細(xì)胞核著色較深，核結(jié)構(gòu)顯示不佳。吉姆薩染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同，而改良吉姆薩染色法是將吉姆薩染色法與瑞氏染色法結(jié)合，兼顧二者之長，使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核均能獲得滿意的染色效果。改良吉姆薩染色液、吉姆薩染色液和瑞氏染色液三種染色液的比較如下：

　　產(chǎn)品名稱改良吉姆薩染色液(20X)吉姆薩染色液(10X)瑞氏染色液

　　產(chǎn)品編號C0131C0133C0135

　　主要成分天青B、天青II-伊紅、亞甲基藍(lán)天青II和伊紅亞甲基藍(lán)和伊紅

　　細(xì)胞質(zhì)顏色粉紅色或藍(lán)色粉紅色或藍(lán)色粉紅色或藍(lán)色

　　細(xì)胞核顏色紫紅色或藍(lán)紫色紫紅色或藍(lán)紫色紫紅色

　　特點(diǎn)將吉姆薩染色和瑞氏染色結(jié)合起來，彌補(bǔ)了兩者各自的缺點(diǎn)對細(xì)胞質(zhì)著色力較強(qiáng)，但細(xì)胞核著色較深，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)顯示不佳細(xì)胞質(zhì)及其中顆粒染色較好，但細(xì)胞核染色質(zhì)及核膜的結(jié)構(gòu)不是很清晰

　　用途主要用于細(xì)胞、血液、骨髓涂片或組織切片的染色主要用于染色體顯帶、寄生蟲和血細(xì)胞的染色主要用于血細(xì)胞的染色

　　改良吉姆薩染色液的主要成分是天青B (azure B)、天青II-伊紅(azure II-eosin)和亞甲基藍(lán)(methylene blue)。其中天青B是一種堿性染料(陽離子染料)，常用于染色體或核酸的染色;伊紅是酸性染料(陰離子染料)，是以氧雜蒽和醌式苯環(huán)作為生色基團(tuán)，以羧基(-COOH)為助色基團(tuán)的染料;亞甲基藍(lán)是堿性染料(陽離子染料)，生色基團(tuán)包括偶氮基(-N=N-)等。染色原理是基于在酸性染料中具有染色作用的陰離子與細(xì)胞內(nèi)的堿性物質(zhì)相結(jié)合，而堿性染料中具有染色作用的陽離子與細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)相結(jié)合。各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對各種染料的親和力也不一樣。細(xì)胞核蛋白主要與天青II和伊紅形成的化合物結(jié)合，使細(xì)胞核呈紫紅色。各類成分由于自身特性與改良吉姆薩染液中不同物質(zhì)結(jié)合呈現(xiàn)不同顏色從而得以區(qū)分。在對其它細(xì)胞染色時，代謝旺盛的細(xì)胞胞質(zhì)含較多蛋白質(zhì)呈酸性，因此與天青II和伊紅形成的化合物結(jié)合呈粉紅色。血細(xì)胞在本染色液染色后的細(xì)胞質(zhì)顏色見下表：

　　血細(xì)胞類型細(xì)胞質(zhì)顏色

　　成熟紅細(xì)胞(Mature red blood cells)粉紅色

　　嗜酸性粒細(xì)胞(Eosinophils)粉紅色

　　嗜堿性粒細(xì)胞(Basophils)藍(lán)紫色

　　中性粒細(xì)胞(Neutrophils)淡紫紅色

　　單核細(xì)胞(Monocytes)、淋巴細(xì)胞(Lymphocytes)藍(lán)紫色或紫紅色

　　本產(chǎn)品染色效果好、染色力強(qiáng)、著色清晰。本產(chǎn)品用于HeLa細(xì)胞的染色效果參考圖1。

　　本產(chǎn)品以無水乙醇為溶劑，與傳統(tǒng)的甲醇溶解法相比，提高了使用的安全性。

　　按推薦稀釋倍數(shù)配制染色工作液(1X)，且每樣使用1ml染色工作液(1X)計算，此時本試劑盒的100ml和500ml包裝分別可以檢測2000個和10000個樣品。

　　包裝清單：

　　產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱包裝

　　C0131-100ml改良吉姆薩染色液(20X)100ml

　　C0131-500ml改良吉姆薩染色液(20X)500ml

　　—說明書1份

　　保存條件：

　　室溫避光保存，至少兩年有效。

　　注意事項：

　　血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻，以免影響染色和拍照。

　　本染色液在稀釋后應(yīng)有類似金屬光澤，否則染色液可能已失效。

　　本染色工作液應(yīng)保持中性，尤其是用于稀釋的PBS。在酸性環(huán)境下，細(xì)胞質(zhì)蛋白正電荷增多，易被伊紅染成紅色;在堿性環(huán)境下，細(xì)胞質(zhì)蛋白負(fù)電荷增多，易被亞甲基藍(lán)染成藍(lán)色。酸性或堿性環(huán)境都會造成染色異常，以致識別困難，影響正確判斷。推薦使用PBS (C0221A)或PBS (10X) (ST476)。

　　吉姆薩染色液對人體有毒性，且易燃。操作時請?zhí)貏e小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

　　本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

　　為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

　　使用說明：

　　1.試劑的準(zhǔn)備工作

　　改良吉姆薩染色工作液(1X)的配制：根據(jù)樣品數(shù)量，取適量改良吉姆薩染色液(20X)，加入PBS或雙蒸水稀釋20倍即成改良吉姆薩工作液(1X)。例如1ml改良吉姆薩染色液(20X)加入19ml PBS，混合均勻，即得20ml改良吉姆薩染色工作液(1X)。注：稀釋后的改良吉姆薩染色工作液(1X)為即用型試劑，不宜保存，應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，以免影響染色效果。

　　2.樣品處理

　　a.對于石蠟切片：

　　二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

　　換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

　　無水乙醇5分鐘。

　　90%乙醇2分鐘。

　　80%乙醇2分鐘。

　　70%乙醇2分鐘。

　　b.對于冰凍切片：

　　蒸餾水洗滌2分鐘。

　　c.對于血液或骨髓涂片：

　　按照常規(guī)方法制作血涂片或骨髓涂片，自然晾干。

　　70%乙醇固定10分鐘。

　　d.對于培養(yǎng)細(xì)胞：

　　加入70%的乙醇固定10分鐘。

　　3.改良吉姆薩染色

　　a.切片或涂片樣品加入適量配制好的改良吉姆薩染色工作液(1X)染色45分鐘。注：如果染色過深或過淺應(yīng)調(diào)整染色時間或工作液濃度。

　　b.用蒸餾水從一側(cè)充分洗滌，干燥后即可在顯微鏡下觀察和拍照。

　　改良吉姆薩染色液上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。古朵試劑盒