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大鼠孕酮(P)elisa試劑盒顯色和比色

2023年07月05日 15:06南京信帆生物技術有限公司點擊量:460

 大鼠孕酮(P)elisa試劑盒顯色和比色


孕酮(progesterone,P)是21C類固醇激素,由膽固醇經孕烯醇酮通過異構酶轉化而成。在婦女,卵巢中的卵泡膜細胞產生P,期間,P則主要由胎盤合體滋養細胞層分泌,故血中P水平主要與胎盤重量及血液灌注量相關。孕早期上升較慢,13周后增快,足月時達高峰。在血中,P主要與皮質類固醇結合蛋白(CBG)及白蛋白相結合,血液中絕大部分P為結合型,極少數為游離型。孕酮主要在肝臟降解,被還原成孕二醇,孕二醇再與硫酸或葡萄糖醛酸結合后經腎排出。P對調節月經周期和維持妊娠具有重要的生理作用,可促進子宮內膜分泌期的轉化,為受精卵著床做準備;松弛子宮肌,降低對前列腺素和催產素的反應性;抑制輸卵管節律性收縮。P還有促乳腺腺泡增生,增加能量代謝,升高基礎體溫,促進水鈉排除的作用。P對下丘腦-垂體系統具有正、負反饋作用,可調控垂體促性腺激素的合成和分泌。排卵前小劑量孕酮協同E3誘發排卵前LH高峰出現,排卵后大劑量P對下丘腦-垂體系統則呈現負反饋作用。


顯色

  顯色是ELISA試驗中最后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。適當提高溫度,有助于加速顯色。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。在定量檢測中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。ELISA顯色結果最好通過酶標儀進行,可減少實驗誤差,提高臨界值樣本的分析準確度。盡量避免肉眼直接判斷結果,因為不同個體的視覺存在差異。應注意,加顯色劑時,要保持顯色劑不外流。加終止液時應避免產生較多氣泡,否則可能使假陽性結果的出現概率增加。


比色

  比色的方法有目視法和酶標比色法2種。目視法簡單明了,但對同一標本,操作者的不同有時會出現不同的結果,具有一定的主觀性。比色的結果通常用光密度表達,現按規定用吸光度表達。酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時的適宜室溫在15℃~30℃之間,使用前要先預熱儀器15~30min,使測得結果更為準確。比色前,應先用潔凈的吸水紙擦拭干凈板底附著的液體,然后將板正確放在酶標比色儀的比色架上。綜上所述,優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。在實際應用過程中,操作者必須熟練掌握基本操作技能,對每個環節進行嚴格仔細的核查,盡量避免假陽性和假陰性反應的出現,保證檢測結果真實可靠,為臨床診斷和疾病防治提供可靠的理論依據。

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