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抗體的選擇和保存指南

2020年07月15日 17:09上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司點(diǎn)擊量:2000

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    今天給大家分享一篇關(guān)于抗體的選擇與保存,搬起小板凳快來(lái)圍觀吧!

    一、抗體的穩(wěn)定性
    1. 抗體的穩(wěn)定性是自然界長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果。抗體是免疫系統(tǒng)中重要的分子之一,其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。在眾多物種中,抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。
    2. 抗體分子的高Tm值。在室溫下,甚至短時(shí)間溫度達(dá)到50-60℃,抗體分子都能維持正確折疊,保持應(yīng)有的活性。
    3. 抗體的純度。采用先進(jìn)的抗體純化技術(shù),確保抗體產(chǎn)品的高純度,保障其抗體產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
    4. 抗體的濃度。高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失,高濃度的抗體穩(wěn)定性更好,抗體產(chǎn)品中93%的濃度大于0.5mg/ml。
 
    二、怎樣確定抗體購(gòu)買渠道和品牌?
    國(guó)外著名抗體品牌的質(zhì)量一般沒(méi)問(wèn)題,但價(jià)格較貴,而且很多抗體品牌本身不生產(chǎn)抗體,所以能找到OEM抗體生產(chǎn)商生產(chǎn)的*抗體。
 
    三、怎樣保存已獲得的抗體?
    抗體無(wú)論是保存還是運(yùn)輸都應(yīng)盡可能地避免反復(fù)凍融,收到抗體后請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要,對(duì)抗體進(jìn)行分裝,避免同一管抗體反復(fù)凍融(反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體空間結(jié)構(gòu)變 性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力)。抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果,如果抗體保存得當(dāng),抗體活性大部分都可以維持?jǐn)?shù)年。 請(qǐng)謹(jǐn)記,無(wú)論何時(shí)請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)推薦的保存條件正確處理和保存抗體。

    1. 收到抗體后,請(qǐng)務(wù)必在4℃,12000rpm,離心3分鐘,(無(wú)論是液體還是凍干粉狀態(tài)),再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請(qǐng)延長(zhǎng) 離心時(shí)間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來(lái))。抗體一般使用特制的儲(chǔ)存管,只有在12000rpm離心3分鐘,才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下 來(lái)(即使是在10000rpm離心也會(huì)離心不*,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象)。

    2. 對(duì)于ProSci大部分抗體,比較合適的保存方式是,分裝后保存在-20℃或者-80℃。
    (1)對(duì)絕大多數(shù)抗體來(lái)說(shuō),保存在-20℃就*足夠了,沒(méi)有任何證據(jù)顯示保存在-80℃會(huì)更好。
    (2)分裝可以Most程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
    (3)分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,少不能少于10ul每份。因?yàn)榉盅b體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。
    (4)復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來(lái)。
    (5)抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,4℃保存盡量不要超過(guò)1天。
    (6)避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中,將抗體保存在冰箱里層,避免溫度變化造成反復(fù)凍融。
 
    3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1~2周對(duì)抗體活性沒(méi)有影響。

    4. 大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過(guò)程需要1~2周的時(shí)間,所以是在低溫4℃的條件下來(lái)完成的。

    4℃運(yùn)輸主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍,這就多了一次凍融的過(guò)程),所以運(yùn)輸過(guò)程中避免干冰運(yùn)輸。

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