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細胞培養實驗中出現沉淀怎么解決

2020年01月19日 13:26上海撫生實業有限公司點擊量:929

細胞培養實驗出現沉淀怎么辦 產生沉淀的可能原因:

1.失水誘導的濃度改變: 如果培養基可能蒸發,培養基組分(包括鹽) 的濃度將會增加,特別是培養基表面可能容易形成晶體沉淀。

2.金屬補充物:銅、鐵和鋅等金屬離子是細胞生長所必需的,是無血清培養基的重要補充物。培養系統中其他血清組分的缺失可能導致這些金屬沉淀,為細胞形成有毒的環境。在較高pH環境下(一般>8時),碳酸鹽和氫氧根離子與銅離子、磷酸鹽和氫氧根離子與鐵離子、碳酸鹽、磷酸鹽和氫氧根離子與鋅離子、氫氧根離子與鎂離子易形成不溶性沉淀物;在氧化條件下,銅和鋅更易于沉淀。

3.鈣鹽: 制備無血清培養基時,組分添加的順序可能導致不可溶分子的形成。鈣鹽尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應產生CaSO4晶體。4.溫度變化:在細胞培養中,溫度是引起沉淀的主要因素之一。當遭遇溫度的變化時,高分子量血漿蛋白會從溶液中析出;熱失活和凍融循環能促進蛋白降解和沉淀;因為液體或重組成培養基在使用之間保持冷藏儲存,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲存液。

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