細(xì)胞名稱 小鼠成肌細(xì)胞；C2C12

形態(tài)特性 成肌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 這是D. Yaffe 和 O. Saxel建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克隆(由H. Blau等人構(gòu)建)。C2C12細(xì)胞株分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。 用骨形成蛋白2(BMP-2)處理，導(dǎo)致分化途徑從成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)換成成骨細(xì)胞。 檢測(cè)表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況 PN5

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測(cè) 陰性

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國(guó)藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

100mg 吲哚布芬 含量測(cè)定 常溫，避光 101060-201001

100mg 托吡酯 HPLC含量 常溫，避光 101061-201001

100mg 鹽酸曲普利啶 含量測(cè)定 常溫，避光 101063-201001

100mg 米力農(nóng) 供HPLC法 常溫，避光 101065-201001

30mg 1,6-二氫-2-甲基-6-氧代 供檢查用 常溫，避光 101066-201001

100mg 甲磺酸倍他司汀 含量測(cè)定 常溫，避光 101076-200901

100mg 尼可地爾 HPLC含量 常溫，避光 101079-201001

100mg 磷酸奧司他韋 含量測(cè)定 常溫，避光 101096-200901

100mg 普瑞巴林 供HPLC法 常溫，避光 101106-201001

50mg 山梨醇 供檢查用 常溫，避光 101109-201001

200mg 地塞米松磷酸酯 供HPLC法 常溫，避光 101116-201001

50mg 非諾貝特雜質(zhì)Ⅰ 供檢查用 常溫，避光 101121-201001

50mg 非諾貝特雜質(zhì)Ⅱ 供檢查用 常溫，避光 101122-201001

30mg 2-巰基* 供檢查用 常溫，避光 101124-201001

100mg 1,3-丙二醇 供檢查用 常溫，避光 101126-201001

50mg 可的松 供HPLC法 常溫，避光 101128-201001

50mg * 供檢查用 常溫，避光 101132-201001

20mg 消旋山莨菪堿雜質(zhì)I 供HPLC含量 常溫，避光 101135-201001

20mg 阿托酸6β-羥基-3α-托品酯 供HPLC含量 常溫，避光 101135-201001

50mg 硫唑嘌呤雜質(zhì) 供檢查用 常溫，避光 101138-201001

50mg 10-甲氧基-4-（1-甲基-4-哌啶基）-4H-苯并[4.5]環(huán)庚[1.2-b]噻吩-4-醇 供HPLC法系統(tǒng)適用性 常溫，避光 101141-201001

50mg 富馬酸酮替芬雜質(zhì)Ⅰ 供HPLC法系統(tǒng)適用性 常溫，避光 101141-201001

100mg 氫后馬托品 供鑒別用 常溫，避光 101143-201001

50mg 反式帕羅西汀 供檢查用 常溫，避光 101144

lectin 9   半乳糖凝集素9（抗原）

Oct-4  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)

OPN(osteopontin)  骨橋蛋白（抗原）

P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)  抑癌基因p16（抗原）

p21/WAF1/CIP1   p21 核分裂抑制因子之一（抗原）

p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B)  p27(抗原)

P63 protein  P63 腫瘤抑制基因（抗原）

OPG(Osteoprotegerin)  護(hù)骨素(多肽抗原)

OPGL (Osteoprotegerin ligand)  骨保護(hù)蛋白配體(抗原)

P311 protein  增生性瘢痕相關(guān)蛋白（抗原）

PARP(poly ADP-ribose polymerase)  多腺苷二磷酸多聚酶抗原

Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（人：N端多肽）、內(nèi)臟脂肪素、 又稱：前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素

Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（人、大、小鼠、猴同源：N端多肽）、內(nèi)臟脂肪素、前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素

Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（抗人、大、小鼠、猴：N端多肽）前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素

PEDF (pigment epithelium-derived factor)  色素上皮源性因子(多肽抗原）

PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c)  磷脂酸磷酸酶2C（抗原）

PEPT1 (Peptide-transporters 1)  腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)多肽

PTEN/MMAC1  一種腫瘤抑制基因抗原

 小鼠成肌細(xì)胞；C2C12PIBF(progesterone induced blocking factor)  孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(抗原)

PIWIL1(piwi-like 1)  piwi 樣1蛋白(抗原)

PPAR Gamma (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma)  過(guò)氧化酶活化增生受體γ（抗原）

PP2Ac  蛋白磷酸酶4(抗原)

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。