當前位置:研生elisa 銷售網點(上海研生實業有限公司)>>ATCC細胞>>人正常組織來源細胞>> 雜交瘤細胞;18A4
細胞名稱 雜交瘤細胞;18A4
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
別 100mg
111578-200201 L-羥脯氨酸 對照品 含量測定 50mg
111579-200201 降香揮發油 對照品 鑒別 0.2ml
111580-200503 甲基橙皮苷 對照品 UV法含量測定 20mg
111581-200403 紫菀酮 對照品 含量測定 20mg
111582-200201 青陽參苷元 對照品 含量測定 20mg
111583-200301 二氫歐山芹醇當歸酸酯 對照品 含量測定 20mg
111588-200501 西紅花苷-I 對照品 20mg
111589- 西紅花苷-II 對照品 20mg
111590-200402 重樓皂苷 I 對照品 含量測定 20mg
111591-200402 重樓皂苷Ⅱ 對照品 含量測定 20mg
111592-200402 重樓皂苷 Ⅵ 對照品 含量測定 20mg
111593-200402 重樓皂苷 Ⅶ 對照品 含量測定 20mg
111594-200501 總銀杏酸 對照品 鑒別 30mg
111595-200402 黃芩素 對照品 含量測定用 20mg
111596-200402 胡黃連苷-Ⅱ 對照品 含量測定 20mg
111597-200503 雷公藤酯甲 對照品 TLC-UV法含量測定 20mg
111598-200502 脫水穿心蓮內酯琥珀酸半酯 對照品 含量測定 20mg
111605-200301 丹參酮ⅡA磺酸鈉 對照品 鑒別 50mg
111607-200402 芒果苷 對照品 含量測定 20mg
111608-200301 金龍膽草提取物 對照品 鑒別 500mg
111610-200503 甘草苷 對照品 含量測定 20mg
111615-200301 苯丙氨酸 對照品 鑒別 20mg
111616-200301(暫行) 牛磺酸 對照品 含量測定 20mg
111617-200301 二甲基甲酰胺 對照品 內標物 0.5ml
111618-200301 膽固醇 對照品 鑒別 50m
inton Agar MH 瓊脂(MHA) 250
弱選擇性培養基,用于腸道致病菌的選擇性分離 China Blue Agar 中國藍瓊脂 250
用于細菌復合生化試驗(葡萄糖,乳糖) Kligler Iron Agar 克氏雙糖鐵瓊脂 250
供分離營養要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板 Blood Agar Base N0.2 血瓊脂基礎2號 250
供分離營養要求較高的致病菌用,后加血液制成血平板 Blood Agar Base 血液瓊脂基礎 250
用于從血液中分離病原菌 Blood Enrichment Medium 血液增菌培養基 250
用于分離真菌,酵母菌等 TTC-Sabourand’s Medium 氯化三苯四氮唑-沙保羅培養基 250
用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(OXOID方法) Maconkey Agar 麥康凱瓊脂 250
用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(OXOID方法) Maconkey Agar(without salt) 麥康凱瓊脂(不含鹽) 250
用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(OXOID方法) Maconkey Agar No.2 麥康凱瓊脂2號 250
用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(OXOID方法) Maconkey Agar No.3 麥康凱瓊脂3號 250
用于分離霍亂弧菌 Alkaline Agar 堿性瓊脂平板 250
用于分離霍亂弧菌 Alkaline Bile Salt Agar 堿性膽鹽瓊脂 250
用于肺炎鏈球菌、布魯氏菌屬細菌的培養 Tryptose Broth Base 胰膘肉湯基礎 100
用于配制血瓊脂、巧克力瓊脂及亞碲酸鹽瓊脂 Blood Agar Base 豆粉瓊脂(血瓊脂基礎) 250
用于L型細菌增菌培養 細菌L型增菌液 65
用于L型細菌分離培養 細菌L型分離瓊脂 110
用于鼠疫桿菌培養 溶血瓊脂基礎 250
用于鼠疫桿菌的選擇性培養 龍膽紫血液瓊脂基礎 250
雜交瘤細胞;18A4用于結核桿菌的培養、計數、保存、照光試驗、藥物敏感性測定及菌型鑒定等 L-G medium Base,modified 改良羅氏培養基基礎 250
適用于堿性物質處理的結核桿菌標本 Acid L-G medium Base 酸性L-G培養基基礎 250
適用于酸性物質處理的結核桿菌標本 Alkalin
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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