總膽固醇（TC）檢測試劑盒說明書

注意：正式測定之前選擇2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

貨號：YX-W-B409 

規格：100T/96S

產品簡介：

總膽固醇（Total Cholesterol，TC）是指所有脂蛋白所含膽固醇的總和，包括游離膽固醇和膽固醇酯。

利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），從而把膽固醇酯轉化為 FC；進一步利用膽固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4-膽甾烯酮和 H₂O₂；最后利用過氧化物酶催化H₂O₂ 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類化合物，其在 500nm 有特征吸收峰，其顏色深淺與TC 含量成正比。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計/酶標儀、天平、低溫臺式離心機、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調式移液槍、EP 管、蒸餾水、異丙醇。

產品內容：

提取液：異丙醇 100mL×1 瓶，自備，4℃保存；

工作液：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；

標準品：粉劑×1支，10mg 膽固醇，4℃保存。

臨用前加入517μL提取液，振蕩溶解，即為50μmol/mL 的膽固醇標準溶液。

總膽固醇（TC）檢測試劑盒操作步驟：

一、樣本處理：

1.組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL

提取液）進行冰浴勻漿。10000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 2 秒，間隔 3 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃離心 10min，取上清置于冰上待測。

3. 血清（漿）樣品：直接測定。

二、測定步驟：

1、 分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 500nm，蒸餾水調零。

2、 將 50μmol/mL 標準液用提取液稀釋為 2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078μmol/mL 的標準溶液備用。

3、 操作表：(在離心管或 96 孔板中依次加入下列試劑)

總膽固醇（TC）檢測試劑盒總膽固醇含量計算
一、標準曲線的繪制：
以各個標準溶液的濃度為x軸，其對應的△A標準為y軸，繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將△A帶入方程得到x（μmol/mL）
二、總膽固醇含量的計算：
1. 血清（漿）中FC含量計算：TC含量（μmol/dL）=x×100。
2. 組織中FC含量計算：
按樣本蛋白濃度計算
TC含量（μmol/mgprot）=x×V提取÷（Cpr×V提?。?x÷Cpr。
按樣本鮮重計算
TC含量（μmol/g鮮重）=x×V提取÷W=x÷W
細胞、細菌中TC含量計算：
TC含量(μmol/104cell)=x×V提取÷500=0.002x。
100：1dL=100mL；V提?。杭尤霕颖镜奶崛∫后w積，1mL；W：樣本質量，g；500:500萬個細胞數量。
總膽固醇（TC）檢測試劑盒注意事項
當△A大于1.5時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定。