表皮生長因子受體EGFR和HER2配體寡肽廠家
西安齊岳生物科技有限公司是國內的抗體偶聯科研(ADCs)、納米顆粒、PEG衍生物;支化聚合物生產制造商;提供的產品有人源化抗P185~(HER-2)單區抗體
Anti-HER2 Fab'修飾包裹素蛋白PE38KDEL的靶向納米粒
靶向HER2和包裹PE38KDEL的PLGA納米球
蜂素與基因變構人白細胞介素-2融合基因
針對HER2靶點的抗體科研
2E8-NCTD素
靶向EGFR隱蔽表位的素
表皮生長因子受體EGFR和HER2配體寡肽
Anti-HER3抗體
多聚精氨酸—胞嘧啶脫氨酶融合蛋白
靶向nAChR激動劑和基于骨架遷躍的EGFR/HER-2劑
L型氨基酸轉運子1(LAT1)和磷酸化s6(phospho-s6,p-s6)核糖體蛋白
多聚精氨酸—胞嘧啶脫氨酶融合蛋白抗活性
抗SSA/Ro 60kDa抗原表位性單克隆抗體
重組人源抗--CTGF scFv二聚體
抗人CD19分子的嵌合抗原受體
融合基因anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3(ζ)
二硫鍵穩定的抗CD3/抗CD 19 (ds-Diabody)微型雙功能抗體
鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9單鏈抗體
抗CD20單鏈抗體
anti-PD-1(scFv)/IL-15/IL-15Rα-sushi(簡稱PD-S15)
鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9單鏈抗體
抗VWF-A3區性單抗SZ-123單鏈抗體
抗CPAα素單鏈抗體基因
表皮生長因子受體EGFR和HER2配體寡肽廠家產品描述:
表皮生長因子受體EGFR/HER1和HER2/neu都是跨膜受體激酶家族(ErbB)的成員,ErbB受體家族與人類癥的關系密切,EGFR和HER2在多種細胞表面異常表達,且ErbB受體發生改變的通常更具有侵襲性,病人也往往預后不良,這使得EGFR和HER2成為抗靶向的靶點。力達霉素(Lidamycin,LDM)是迄今報道過的對細胞殺傷作用強的大分子肽類抗,由輔基蛋白(LDP)和烯二炔結構的發色團(AE)兩部分組成,發色團是力達霉素分子的活性部分。的目的是構建一種靶向EGFR和HER2的雙性強化融合蛋白(Ec-LDP-Hr-AE),并對其體內外抗活性進行檢測。 方法:雙性融合蛋白Ec-LDP-Hr的構建主要采用PCR擴增和DNA克隆。pelB信號肽序列、寡肽配體Ec基因序列、寡肽配體Hr基因序列以及(GGGGS)_2連接肽基因序列均采用人工合成的方法得到,并作為PCR引物,經過5輪PCR擴增以及DNA克隆后,得到了融合蛋白基因Ec-ldp-Hr,將該基因經過雙酶切后插入到pET30a(+)表達載體中,得到重組表達載體pET-Ec-ldp-Hr。為了進行比較,同時構建了單靶點的重組表達載體pET-Ec-ldp和pET-ldp-Hr。將三種表達載體均轉化到大腸桿菌BL21(DE3)star~(TM)中,加入IPTG進行誘導表達,SDS-PAGE分析目的蛋白的表達情況。融合蛋白的提取采用滲透壓震驚法,使用Ni~(2+)親和層析法分離純化融合蛋白,HPLC檢測融合蛋白的純度,Western Blot對純化出的融合蛋白進行鑒定。融合蛋白與細胞表面EGFR和HER2的親和活性主要采用了ELISA、細胞熒光化學法、基于流式細胞術的熒光試驗、競爭性熒光試驗以及共沉淀進行分析。將LDM活性發色團分子(AE)與融合蛋白在體外進行分子組裝,得到強化融合蛋白(Ec-LDP-Hr-AE),采用MTT法測定強化融合蛋白對細胞的體外殺傷活性。細胞熒光染色和基于流式細胞術的熒光檢測用于分析融合蛋白是否可內吞進入細胞以及檢測內吞效率。雙性強化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE的體內抗活性采用人SK-OV-3裸鼠移植模型進行評價。結果:經過5輪PCR擴增以及DNA克隆后,得到了融合蛋白基因Ec-ldp-Hr,將其插入到表達載體后成功實現了在大腸桿菌中的表達。Ec-LDP-Hr蛋白和Ec-LDP蛋白主要以可溶性的形式分泌到了大腸桿菌周質腔中,而LDP-Hr蛋白除存在于周質腔中外,還分泌到了培養液上清中。
Ni~(2+)親和層析對周質腔中的蛋白進行純化,得到的目的蛋白經HPLC檢測純度均在95%以上。Ec-LDP-Hr、Ec-LDP和LDP-Hr三種融合蛋白的產量分別為每升發酵液得到9 mg、18 mg和60 mg活性蛋白。將純化的蛋白用Western blot方法進行鑒定,了純化的蛋白為帶有His-tag標簽的目的蛋白。ELISA和基于流式細胞術的熒光試驗結果顯示Ec-LDP-Hr蛋白對EGFR和HER2高表達的細胞系,如A431、SK-BR-3、SK-OV-3、MCF-7均有很強的結合活性,而對不表達EGFR和HER2的NIH 3T3細胞則無親和活性。細胞熒光化學試驗了Ec-LDP-Hr蛋白可以與A431和SK-BR-3細胞表面的受體結合,共沉淀試驗則進一步證明了Ec-LDP-Hr蛋白是與A431和SK-BR-3細胞表面的EGFR和HER2結合的;競爭性熒光試驗結果顯示,Ec-LDP-Hr蛋白可部分抗EGFR和抗HER2抗體與各自抗原的結合能力,表明該蛋白可競爭性的與EGFR和HER2結合。
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